羊布氏菌vjbR基因的克隆及原核表达
卜昭阳1，2，王景龙1，李晓艳1，2，万丽娜3，郎需龙1，2，万忠海1，2，孟柯音1，2，王兴龙1，2
摘要(Abstract)：
目的 克隆并原核表达羊布氏菌强毒株16MvjbR基因。方法PCR扩增羊布氏杆菌16M株vjbR基因，亚克隆至原核表达载体pET-28a中，构建重组原核表达质粒pET-28a-vjbR，转化感受态大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经His Trap FF纯化后，进行Western blot分析。 结果 扩增的 vjbR基因大小为708 bp，与预期一致；重组原核表达质粒pET-28a-vjbR经双酶切及测序证明构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约为29 000，诱导4 h表达量可达6. 84 mg /ml；纯化的重组蛋白纯度为65. 7%，能被羊布氏杆菌阳性血清所识别。结论 成功在大肠杆菌中表达了羊布氏菌VJBR蛋白，为其功能的研究、羊布病诊断试剂盒的研制及亚单位疫苗的研发奠定了基础。关键词：羊布氏菌；vjbR基因；密度感应系统；克隆；原核细胞；基因表达
关键词(KeyWords)：
羊布氏菌；vjbR基因；密度感应系统；克隆；原核细胞；基因表达
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作者(Author):
卜昭阳1，2，王景龙1，李晓艳1，2，万丽娜3，郎需龙1，2，万忠海1，2，孟柯音1，2，王兴龙1，2