中国生物制品学杂志

2015, v.28(08) 823-826+831

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HPLC法测定肺炎球菌多糖疫苗中的苯酚含量
Determination of phenol content in pneumococcal polysaccharide vaccine by HPLC

王春娥;李茂光;石继春;陈琼;毛琦琦;张丽莉;陈翠萍;叶强;

摘要(Abstract):

目的建立测定肺炎球菌多糖疫苗中苯酚含量的HPLC法。方法采用Novo-Pak C-18色谱柱(3.9 mm×150 mm,4μm),以甲醇-水(20∶80)为流动相进行洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为271 nm,柱温为25℃,进样量为10μl。对该方法的适用性、专属性、精密度、重现性、稳定性、准确性进行验证,并确定该方法的线性范围及定量限。用建立的方法检测6批23价肺炎球菌多糖疫苗中苯酚含量,并与溴量滴定法进行比较。结果苯酚浓度在0.031 25~0.500 2 mg/ml范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000),定量限为0.31μg/ml;供试品溶液的色谱峰与苯酚对照品溶液的主峰保留时间均约在4.5 min;苯酚对照品溶液连续进样6次,峰面积相对标准偏差(RSD)为0.09%,保留时间的RSD为0.02%;6份同1批供试品溶液中苯酚含量的均值为2.42 mg/ml,RSD为0.48%;同1份供试品溶液室温下放置,0~24 h测定12次,保留时间均值为4.485,RSD为0.53%,峰面积平均值为1 037 336,RSD为0.29%;9份加标供试品溶液的平均回收率为99.63%,RSD为1.18%。6批23价肺炎球菌多糖疫苗中苯酚含量的两种方法检测结果基本一致。结论建立的HPLC法操作简便,专属性、精密度、准确度、重现性、稳定性好,可对23价肺炎球菌多糖疫苗中的苯酚进行准确定量。

关键词(KeyWords): 高效液相色谱法;肺炎球菌多糖疫苗;苯酚

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA02A402)

作者(Author): 王春娥;李茂光;石继春;陈琼;毛琦琦;张丽莉;陈翠萍;叶强;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.001007

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