中国生物制品学杂志

2019, v.32(03) 333-337

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重组人溶菌酶的分离纯化及鉴定
Isolation,purification and identification of recombinant human lysozyme

邓晗;史瑾;郝东;王维;赵金礼;

摘要(Abstract):

目的建立重组人溶菌酶(human lysozyme,h LYZ)的分离纯化方法,并对纯化产物进行鉴定。方法采用固液分离、膜过滤、疏水层析及离子交换层析对hLYZ进行分离纯化;SDS-PAGE及HPLC法检测hLYZ纯度;按《中国药典》二部(2015版)蛋清溶菌酶效价检查法检测其效价;Western blot法检测其特异性;基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF)测定其相对分子质量。结果该分离方法可获得单一组分的重组hLYZ;SDS-PAGE检测纯度达99%,HPLC分析纯度达98. 8%;纯化后的hLYZ可与抗人LYZ抗体特异性结合,活性为1. 2×105 U/mg,相对分子质量为14 697。结论建立的分离纯化方法易操作,成本低,得到的hLYZ纯度大于98%,该分离方法可用于hLYZ的规模化生产。

关键词(KeyWords): 重组人溶菌酶;疏水层析;离子交换层析;纯化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Authors): 邓晗;史瑾;郝东;王维;赵金礼;

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002508

参考文献(References):

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