中国生物制品学杂志

2017, v.30(01) 19-24

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人呼吸道合胞病毒截短F1蛋白的原核表达及其免疫原性评价
Prokaryotic expression and immunogenicity of human respiratory syncytial virus truncated F1 protein

李华;杨婷;岳磊;何晓娟;朱凡丽;谢天宏;龙润乡;杨蓉;罗芳宇;谢忠平;

摘要(Abstract):

目的原核表达重组人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)A型Long株截短F1融合性蛋白,并评价其免疫原性。方法采用RT-PCR法扩增HRSV截短F1蛋白基因序列,克隆至pET-28b表达载体,构建重组原核表达质粒RSV F1/pET-28b,转化大肠埃希菌Shuffle T7菌株,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析;用Ni亲和层析柱纯化,纯化产物经SDS-PAGE及Western blot分析。将纯化的重组截短F1蛋白免疫ICR小鼠,ELISA法检测小鼠血清抗体效价。结果重组原核表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的截短F1蛋白相对分子质量约44 000,主要以包涵体形式存在,纯度达90.6%。重组截短F1蛋白免疫小鼠血清抗体效价最高可达1∶4 096。结论原核表达的重组HRSV截短F1蛋白免疫原性好,为单克隆抗体的制备及检测试剂盒的研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 呼吸道合胞病毒;截短F1蛋白;原核表达;免疫原性

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家高技术研究发展计划(863计划项目)(2012AA02-A404);; 云南省应用基础研究面上项目(2011FZ210)

作者(Author): 李华;杨婷;岳磊;何晓娟;朱凡丽;谢天宏;龙润乡;杨蓉;罗芳宇;谢忠平;

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