中国生物制品学杂志

2008, (09) 771-773

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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达
Cloning and High Expression of Helicobacter pylori Urease B Subunit Gene

朱卫华;李生迪;宣俊文;陈翠萍;

摘要(Abstract):

目的克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E.coliBL21(DE3)、Origam(iDE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确。3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%。Western blot结果表明,表达的目的蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rossetta(DE3)中获得了高效表达。

关键词(KeyWords): 幽门螺杆菌;尿素酶B亚单位;克隆;原核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 朱卫华;李生迪;宣俊文;陈翠萍;

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