中国生物制品学杂志

1995, (02) 49-52

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HIV-1 gag和env基因片段的构建及表达
Construction and Expression of HIV-1 gag and env Gene Fragments in E.coli

祁自柏,谷金莲,BercoffRP

摘要(Abstract):

为研究人免疫缺陷病毒(HIV-1)的分子生物学,发展艾滋病的诊断试剂,克隆了含HIV-1env和gag基因cDNA的质粒pUCF12。用PvuⅡ和HincⅡ降解pUCF12质粒,得到含部分p17、全部p24和全部p15基因的cDNA片段,用BglⅡ降解pUCF12质粒得到含有部分gp120和全部gp41的cDNA片段。将该两个片段分别亚克隆到表达载体PGex上,在pTac启动子的调控下,部分gag基因和env基因在大肠杆菌中表达.在SDS-PAGE中,GST+gag融合蛋白呈现一条约70kD的染色带,其表达水平约占菌体总蛋白的18%.而GST-env蛋白则呈现一条约65kD的蛋白带,该表达蛋白约占菌体总蛋白的15%。经免疫印迹分析,该两种表达产物可分别与抗-P24和抗-gP41的单克隆抗体反应,用Abbott试剂也证明为HIV-1抗原蛋白。

关键词(KeyWords): 人免疫缺陷病毒(HIV-1);gag基因;env基因

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 祁自柏,谷金莲,BercoffRP

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