中国生物制品学杂志

2015, v.28(07) 746-748

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液质联用法分析重组假丝酵母尿酸氧化酶的二硫键
Analysis of disulfide bond in recombinant Candida uricase by ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry

陶磊;裴德宁;饶春明;王军志;

摘要(Abstract):

目的采用液质联用法分析重组假丝酵母尿酸氧化酶的二硫键数量及存在方式。方法将重组假丝酵母尿酸氧化酶分别进行烷基化及变性后烷基化处理,液质联用法测定未处理及两种不同方法处理后的尿酸氧化酶的平均相对分子质量,根据测定结果判断其二硫键数量及存在方式。结果未处理样品的平均相对分子质量为34 076.80,表明该蛋白以单体形式存在,不存在链间二硫键;直接烷基化样品平均相对分子质量为34 133.40,仅有一个游离巯基被烷基化;变性后烷基化样品的平均相对分子质量为34 304.80,4个游离巯基全被烷基化,蛋白不存在链内二硫键。结论重组假丝酵母尿酸氧化酶中的4个半胱氨酸未形成链间及链内二硫键。

关键词(KeyWords): 液相色谱法;质谱法;假丝酵母;尿酸氧化酶;二硫键

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 十二五科技重大专项“生物技术药物质量标准和质量控制技术平台”(2012ZX09304010)

作者(Author): 陶磊;裴德宁;饶春明;王军志;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.000965

参考文献(References):

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