中国生物制品学杂志

2008, (09) 756-758

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口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达
Construction of Recombinant Plasmid for Fusion Expression of Foot and Mouth Disease Virus 2B Gene and Green Fluorescent Protein Gene

崔丽瑾;王兴龙;梅英武;任林柱;闫广谋;张辉;郎需龙;段小宇;路浩;

摘要(Abstract):

目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。

关键词(KeyWords): 口蹄疫病毒;2B基因;绿色荧光蛋白;融合表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 军事医学科学院科技创新基金资助项目;; 吉林省科技厅科技发展计划项目(20050549)

作者(Author): 崔丽瑾;王兴龙;梅英武;任林柱;闫广谋;张辉;郎需龙;段小宇;路浩;

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