中国生物制品学杂志

2008, (04) 269-272

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抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达
Expression of Antimicrobial Peptide Dermaseptin S4 Gene and Its Mutant in E. coli

张庆华;韩跃武;谢俊秋;卢天龙;任惠子;冯惟萍;

摘要(Abstract):

目的构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的蛋白。方法采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定。结果构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的特异性目的条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在。结论已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础。

关键词(KeyWords): 抗菌肽;Dermaseptin S4;突变体;大肠杆菌;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2006AA10A208-1-4)

作者(Authors): 张庆华;韩跃武;谢俊秋;卢天龙;任惠子;冯惟萍;

DOI: 10.13200/j.cjb.2008.04.18.zhangqh.001

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