中国生物制品学杂志

2012, v.25(09) 1121-1124

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甲型肝炎病毒Js-4株经人二倍体细胞传代后的核苷酸序列分析
Nucleotide sequencing of hepatitis A virus Js-4 strain subcultured in human diploid cells

胡艳灵;陈统球;黄明;戚凤春;崔燕萍;潘翔;

摘要(Abstract):

目的分析甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)Js-4株经人二倍体细胞MRC-5传代后的核苷酸序列变异情况。方法将HAV Js-4株经Vero细胞适应14代获得的原始株Js-4-V14经人二倍体细胞MRC-5于35℃连续适应培养15代,取其中8个适应株(Js-4-M2、Js-4-M3、Js-4-M4、Js-4-M5、Js-4-M10、Js-4-M12、Js-4-M14、Js-4-M15)及原始株,提取病毒基因组RNA,通过RT-PCR扩增病毒全基因组,采用生物信息学软件DNAstar Lasergene 7进行序列分析。结果 8个适应株全基因组与Js-4-V14株的核苷酸序列同源性在99.8%~100.0%之间;第5代适应株在5′-NCR(101~200 bp)发生较大变异,表现为105~157 bp缺失,之后该突变稳定遗传;第10、12、14、15代适应株在2A(3 012~3 210 bp)区段3 122位点发生点突变;8个适应株和Js-4-V14毒株与野毒株HM175为同一基因亚型,均为IB型;9个毒株的主要抗原位点与野生株HM175完全一致。结论 HAV Js-4-V14株在MRC-5细胞传代适应过程中,主要抗原位点未发生突变,其与细胞适应性和病毒增殖有关的基因在传代早期已经变异,传代后期这些变异保持相对稳定。

关键词(KeyWords): 肝炎病毒,甲型;二倍体细胞系;连续传代;序列分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 胡艳灵;陈统球;黄明;戚凤春;崔燕萍;潘翔;

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