中国生物制品学杂志

2019, v.32(12) 1402-1406+1410

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

柱前衍生HPLC法测定人凝血因子Ⅷ中氨基酸的含量
Determination of amino acid content in human coagulation factor Ⅷ by HPLC with pre-column derivation

王月;喻剑虹;刘莹;罗晶;郑宵蓓;张雪;龚钦;

摘要(Abstract):

目的建立人凝血因子Ⅷ中氨基酸含量的柱前衍生HPLC检测方法。方法采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(6-aminoquinoline-N-hydroxysuccinimide carbamate,AQC)在一定条件下与氨基酸形成稳定的衍生产物(柱前衍生),再通过高效液相色谱仪,采用氨基酸分析柱(150 mm×3. 9 mm,4μm)检测,以不同流动相进行梯度洗脱[在《中国药典》三部(2015版)的基础上进行调整],柱温为37℃,流速为1. 0 mL/min,检测波长为248 nm。同时验证方法的系统适应性、专属性、线性范围、精密性及准确度。结果甘氨酸及盐酸赖氨酸均可在25 min内获得较好分离,与相应相邻色谱峰之间的分离度均> 1. 5,拖尾因子在0. 95~1. 40之间;各样品的氨基酸种类均能正确检出,混合样品与单纯样品出峰时间保持一致,且供试品溶液与对照品溶液主峰保留时间相对偏差均<2%;当甘氨酸浓度在12. 5~62. 5μg/mL,盐酸赖氨酸浓度在4. 0~20. 0μg/mL时,与相应氨基酸与内标峰面积比呈良好的线性关系,相关系数(r)分别为0. 999 9和0. 999 8;甘氨酸及盐酸赖氨酸重复性的相对标准偏差(RSD)分别为0. 4%和0. 5%,中间精密度RSD分别为1. 3%和1. 0%;两种氨基酸的回收率均在95%~105%范围内,RSD均≤2%。结论建立的方法具有良好的专属性、精密性及准确度,可用于测定人凝血因子Ⅷ中的氨基酸含量。

关键词(KeyWords): 人凝血因子Ⅷ;氨基酸含量;柱前衍生化;HPLC;甘氨酸;盐酸赖氨酸

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 王月;喻剑虹;刘莹;罗晶;郑宵蓓;张雪;龚钦;

Email:

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002921

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享