中国生物制品学杂志

2015, v.28(04) 348-351

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细胞因子信号抑制因子1基因真核高表达质粒的构建及其在NOK细胞中的表达
Construction of eukaryotic expression vector for suppressor of cytokine signaling 1 and its expression in NOK cells

许雅鑫;吴彬;游锦梅;李钰;Yang Yong;陈显久;

摘要(Abstract):

目的构建细胞因子信号抑制因子1(suppressors of cytokine signaling 1,SOCS1)基因真核高表达质粒,并在口腔上皮细胞系NOK细胞中进行表达。方法提取健康人外周静脉血基因组DNA,PCR扩增SOCS1基因,与p EGFPN1载体连接,构建重组真核表达质粒p EGFP-N1-SOCS1,用Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切鉴定及测序后,转染NOK细胞,采用荧光显微镜及Western blot法检测转染细胞中SOCS1蛋白的表达。结果重组真核表达质粒p EGFP-N1-SOCS1经双酶切及测序鉴定证实构建正确。p EGFP-N1-SOCS1转染NOK细胞72 h后获得表达,SOCS1蛋白的表达量为(134.67±9.07)%,较转染空质粒组约升高4倍,二者差异有统计学意义(P=0.001)。结论成功构建了SOCS1基因真核高表达质粒,为进一步研究SOCS1的生物学功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 细胞因子信号抑制因子1;真核细胞;基因表达;NOK细胞

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山西省科技(工业)攻关项目基金资助(20110321076-02);; 山西省国际科技合作项目基金资助(2012081050-1)

作者(Author): 许雅鑫;吴彬;游锦梅;李钰;Yang Yong;陈显久;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.000844

参考文献(References):

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