中国生物制品学杂志

2009, v.22(11) 1057-1062

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白眉蝮蛇去整合素Adinbitor定点突变体的构建及其功能检测
Construction and Function of Site-directed Mutant of Adinbitor, A Disintegrin from Gloydius blomhoffi brevicaudus

胡燕荣;刘淑清;赵霆;田余祥;洪艳;于丽华;崔秀云;赵宝昌;

摘要(Abstract):

目的构建白眉蝮蛇去整合素Adinbitor的RIARGD→RPTRGD突变体,研究其主要功能及其作用的分子机制。方法重叠延伸PCR法获得Adinbior定点突变cDNA序列,表达并纯化突变体蛋白。血小板聚集试验检测其对血小板聚集的影响;鸡绒毛尿囊膜模型体内血管新生试验检测其对血管新生的抑制功能;流式细胞仪检测其对血小板膜受体去整合素αⅡbβ3与CD41结合的影响。结果双酶切、PCR及测序证实突变体构建正确,纯化的突变体蛋白纯度在90%以上。野生型Adinbitor可识别αⅡbβ3,竞争性抑制纤维蛋白原与血小板结合,从而发挥抑制血小板聚集的功能;在相同剂量下,突变型Adinbitor几乎不具备此功能,而保留了抑制血管新生的功能。结论已成功构建了白眉蝮蛇去整合素Adinbitor定点突变体,与野生型Adinbitor比较,突变体抑制血小板聚集的功能得到了有效抑制,抑制血管新生功能保持不变,为其今后的功能开发奠定了理论基础。

关键词(KeyWords): 去整合素;Adinbitor;突变;血小板聚集;血管新生;αⅡbβ3

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(30572141)

作者(Author): 胡燕荣;刘淑清;赵霆;田余祥;洪艳;于丽华;崔秀云;赵宝昌;

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