中国生物制品学杂志

2011, v.24(06) 653-656

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GalR2基因真核表达质粒的构建及鉴定
Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector for GalR2 Gene

张丹;杨春;何永林;靳志栋;佘茜;徐蕾;张鹏;

摘要(Abstract):

目的构建GalR2基因真核表达质粒,并在HeLa细胞中表达。方法从C57BL∕6J小鼠海马组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增GalR2基因,克隆至pEGFP-C1载体中,构建重组真核表达质粒pEGFP-GalR2。将重组表达质粒转染至HeLa细胞,荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位,RT-PCR和Western blot分别检测GalR2基因的转录及表达。结果从C57BL∕6J小鼠海马组织扩增出1 116 bp的GalR2基因;重组表达质粒pEGFP-GalR2经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;转染细胞融合基因的表达产物定位于细胞核,GalR2基因在mRNA及蛋白水平上均有表达。结论已成功构建了GalR2基因真核表达质粒pEGFP-GalR2,并在HeLa细胞中成功表达了GalR2蛋白,为进一步探讨GalR2的生物学活性奠定了基础,也为寻找抗抑郁药物的靶点提供了新的思路。

关键词(KeyWords): 受体,G蛋白偶联;GalR2基因;HeLa细胞;抑郁症

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 张丹;杨春;何永林;靳志栋;佘茜;徐蕾;张鹏;

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参考文献(References):

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