中国生物制品学杂志

2010, v.23(04) 341-345

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

肠道病毒71型P1和3CD基因双顺反子重组腺病毒的构建及表达
Construction and Expression of Bicistronic Recombinant Adenovirus with P1 and 3CD Genes of Enterovirus 71

戈小琴;李鸿钧;王文举;谢天宏;张光明;孙茂盛;

摘要(Abstract):

目的构建肠道病毒71型(EV71)P1和3CD基因双顺反子重组腺病毒,并检测3CD蛋白酶的切割作用和表达产物的抗原性。方法采用RT-PCR法从阜阳分离的EV71中扩增P1和3CD基因,构建穿梭质粒pShuttle-CMV-P1-3CD、pShuttle-CMV-P1和pShuttle-CMV-3CD;经同源重组获得重组腺病毒rAd-P1-3CD、rAd-P1和rAd-3CD,分别转染293细胞,RT-PCR法检测目的基因的转录,免疫荧光法检测目的蛋白的表达。结果3种重组腺病毒经PCR和酶切鉴定表明构建正确;RT-PCR检测表明,3个重组腺病毒均已转录目的基因mRNA;免疫荧光检测仅观察到rAd-P1-3CD表达产物具有特异性,而rAd-P1、rAd-3CD未能检测到特异性表达产物。结论已成功构建EV71P1和3CD基因双顺反子重组腺病毒,表达产物具有EV71特异抗原性,提示P1产物只有在被3CD蛋白酶切割后才体现抗原性。

关键词(KeyWords): 肠道病毒71型;P1基因;3CD基因;双顺反子;重组腺病毒

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 戈小琴;李鸿钧;王文举;谢天宏;张光明;孙茂盛;

Email:

DOI: 10.13200/j.cjb.2010.04.11.gexq.001

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享