中国生物制品学杂志

2012, v.25(01) 32-35

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人FBP17基因重组真核表达质粒的构建及其在LO2细胞中的表达
Construction of recombinant eukaryotic expression vector for human FBP17 gene and its expression in LO2 cells

王蕴红;张乾英;朱重阳;李鑫;张军;

摘要(Abstract):

目的构建人FBP17基因重组真核表达质粒,并检测其在人正常肝细胞LO2中的表达及对细胞存活率的影响。方法用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-C1-FBP17质粒,胶回收FBP17基因片段,与p3XFLAG-CMV-10载体连接,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-CMV-10/FBP17,LipofectamineTM法转染人正常肝细胞LO2,RT-PCR和Western blot法检测转染细胞中FBP17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平,XTT法检测其对转染细胞增殖的影响。结果重组表达质粒p3XFLAG-CMV-10/FBP17经双酶切及测序证实构建正确;转染该重组质粒的LO2细胞FBP17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均明显增高,且该质粒转染对细胞存活率无影响。结论成功构建了FBP17基因重组真核表达质粒,其可在LO2细胞中表达,且对细胞的存活率无影响,为进一步研究FBP17相互作用蛋白及其功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): FBP17基因;LO2细胞;细胞骨架

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(20803098);; 重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ080301)

作者(Author): 王蕴红;张乾英;朱重阳;李鑫;张军;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2012.01.37.wangyh.003

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