中国生物制品学杂志

2017, v.30(02) 196-200

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重组人凝血因子Ⅷ制备工艺中纳米膜的选择
Selection of nanomembrane in manufacturing process of recombinant human coagulation factor Ⅷ

寇鹏;杨金亮;梁洪;李德款;李成;伍立恒;姜晓;雷韬;

摘要(Abstract):

目的选择适用于重组人凝血因子Ⅷ(recombinant human coagulation factorⅧ,rh FⅧ)制备工艺中的纳米膜。方法将rh FⅧ收获液Ⅰ(含吐温80)和收获液Ⅱ(不含吐温80)经4种不同型号的滤器(Duropore~、Kleenpak~、Minisart~、Virosart~max)进行预过滤,检测样品活性回收率及蛋白回收率。用不同厂家的20 nm孔径纳米膜(Nano1~Nano7)对预过滤样品进行过滤,检测样品的活性回收率、蛋白回收率及过滤通量。以粒径约20 nm的细小病毒(minute virus of mice,MVM)作为指示病毒,对筛选出的纳米膜进行病毒去除验证。结果确定最佳预过滤膜为minisart~,收获液Ⅰ和收获液Ⅱ的活性收获率分别为87.9%和99.1%,蛋白回收率分别为97.3%和98.2%。确定收获液Ⅰ的最佳过滤纳米膜为Nano6,样品活性回收率为100%,蛋白回收率为92.6%,过滤通量为16.44 L/(m2·h);收获液Ⅱ的最佳纳米膜为Nano7,样品活性回收率为98%,蛋白回收率为86%,过滤通量为26.54 L/(m2·h)。Nano6和Nano7的病毒去除验证均合格。结论筛选的纳米膜可用于rh FⅧ的产业化生产工艺中。

关键词(KeyWords): 重组人凝血因子Ⅷ;纳米膜;活性回收率;蛋白回收率;过滤通量

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 寇鹏;杨金亮;梁洪;李德款;李成;伍立恒;姜晓;雷韬;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.001666

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