中国生物制品学杂志

2015, v.28(10) 1057-1062

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

人血清中抗伤寒Vi多糖特异IgG抗体含量ELISA检测方法的建立及验证
Development and verification of ELISA for typhoid Vi polysaccharide-specific Ig G content in human sera

刘月萍;范锋锋;周海飞;许博;王欣茹;金鑫;赵志强;祝秉东;谢贵林;谭小梅;

摘要(Abstract):

目的建立测定人血清中抗伤寒Vi多糖特异Ig G抗体含量的ELISA方法,并进行验证。方法以美国国立卫生研究院(National Institutes of Health,NIH)测定Vi抗体的ELISA方法为主要参考,对包被抗原、不同吸附力酶标板、抗原包被浓度、样品反应条件、显色时间进行优化,建立测定人血清中抗伤寒Vi多糖Ig G抗体含量的ELISA方法,并对建立的方法进行特异性、线性、准确性、精密度、最低检测限验证。结果优化的ELISA法为:以伤寒Vi多糖作为包被抗原,costar92592型酶标板作为检测酶标板,2.0μg/ml为抗原包被浓度,20~25℃过夜为样品的反应条件,在40~80 min内(A405值在1.8~2.5之间)终止显色。质控血清经不同含量多糖吸收后,抗体含量与多糖浓度具有明显的浓度依赖关系,多糖抑制率最高可达92%;血清稀释度与抗体含量存在负相关的线性关系,R2=0.999;本试验检测的质控血清抗体浓度为76.80 EU/ml,变异系数(CV)=8.55%,与美国NIH检测的数据(75 EU/ml,CV≤15%)一致性良好;该方法重复性(CV≤15%)及中间精密度(CV≤20%)均符合要求;最低检测限为0.78 EU/ml。结论建立了人血清中抗伤寒Vi多糖特异Ig G抗体含量ELISA检测方法,该方法特异性、线性、准确性、精密度良好,可快速、准确地检测人血清中抗伤寒Vi多糖Ig G抗体含量。

关键词(KeyWords): 伤寒Vi多糖;免疫球蛋白G;酶联免疫吸附测定;验证

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 重大新药创制科技重大专项疫苗综合性大平台(2013ZX09402302-212)

作者(Author): 刘月萍;范锋锋;周海飞;许博;王欣茹;金鑫;赵志强;祝秉东;谢贵林;谭小梅;

Email:

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享