中国生物制品学杂志

2016, v.29(04) 384-388

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肠道病毒71型多克隆抗体F(ab’)2片段的制备及其体外中和效果评价
Preparation and in vitro neutralizing effect of F(ab')2 fragment of polyclonal antibody against enterovirus 71

岳磊;朱凡丽;李华;杨婷;谢天宏;龙润乡;杨蓉;罗芳宇;谢忠平;

摘要(Abstract):

目的制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)多克隆抗体F(ab’)2片段,并评价其体外中和效果。方法采用硫酸铵分级沉淀法从EV71感染的兔血清中提取Ig G,用胃蛋白酶进行酶解,正交试验确定最佳酶解条件;使用阴离子交换层析(Q Sepharose Fast Flow)纯化得到F(ab’)2片段,采用体外中和试验检测其对EV71的中和效果。结果硫酸铵分级沉淀法得到电泳纯的Ig G;最佳酶解条件为:胃蛋白酶与Ig G按1∶10的质量比混合,47℃反应4 h,在此条件下,F(ab’)2的产率最大值为79.51%,且方差分析表明,酶切比例对F(ab’)2产率的影响最大,温度次之,时间对F(ab’)2产率的影响不明显;经阴离子交换层析纯化,可有效去除Fc片段,得到电泳纯的F(ab’)2;F(ab’)2具有与Ig G、正常血清同等的中和效果。结论成功制备了EV71兔多克隆抗体F(ab’)2片段,初步确定该F(ab’)2片段具有良好的体外中和效果。

关键词(KeyWords): 肠道病毒71型;多克隆抗体;F(ab’)2片段;正交试验;中和效果

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 云南省应用基础研究计划面上项目(2013FZ135,2013-FZ134)

作者(Author): 岳磊;朱凡丽;李华;杨婷;谢天宏;龙润乡;杨蓉;罗芳宇;谢忠平;

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