中国生物制品学杂志

2017, v.30(08) 828-832

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一种单克隆抗体的电荷异质体分析
Analysis of charge variants of a monoclonal antibody

陈捷敏;郑欣桐;周芳;马红霞;林军;

摘要(Abstract):

目的对抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)单克隆抗体的电荷异质体进行结构鉴别及生物学功能分析。方法通过检测抗PD-1单克隆抗体经专一性蛋白酶(唾液酸酶及羧肽酶)酶切前后的变化,初步确认电荷异质体的种类。采用阳离子交换色谱对电荷异质体进行分离和收集,经联用液相色谱-质谱(LC-MS)法分析电荷异质体各组分的组成;通过抑制抗原与配体相互作用影响NFAT荧光素酶报告基因表达的方法确定电荷异质体的生物学功能。结果碱性异质体含量较少,主要变化为重链N-末端谷氨酰胺未环化;酸性异质体主要变化为重链N383脱氨化和糖链末端唾液酸化。各异质体的生物学活性为89%~102%。结论抗PD-1单克隆抗体电荷异质体大部分修饰位点均远离互补决定区(complementary determining region,CDR),且在体外生物学活性方面差异较小。

关键词(KeyWords): 单克隆抗体;电荷异质体;离子交换色谱;联用液相色谱-质谱法;生物学活性

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 陈捷敏;郑欣桐;周芳;马红霞;林军;

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