中国生物制品学杂志

2008, (06) 479-482

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重组蛹虫草超氧化物岐化酶脱辅基蛋白的表达、纯化及其活性重建
Expression and Activity Reconstitution of Recombinant Cordyceps militaris Superoxide Dismutase Apoprotein

胡圣尧;聂志妍;王尊生;袁勤生;

摘要(Abstract):

目的表达并纯化重组蛹虫草超氧化物歧化酶脱辅基蛋白,并考查各种金属离子对其活性重建的作用。方法用不含Cu2+和Zn2+的培养基培养重组菌株,并表达重组蛋白,采用DEAE-FF和CM-52进行纯化;在脱辅基蛋白溶液中加入Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+或Ag+,测定SOD酶活力的变化。结果蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD在不含Cu2+和Zn2+的培养基中得到表达,纯化后的样品经SDS-PAGE分析,在相对分子质量17000处出现单一条带,经活性电泳分析无酶活力;脱辅基蛋白活性重建的最适宜Cu2+浓度为0.005mmol/L,但其紫外吸收图谱与天然SOD不同;0.1mmol/L的Mn2+、Mg2+、Ni2+、Ag+重建的酶活力远低于Cu2+重建的cm-SOD的酶活力。结论已成功表达并纯化了蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD,各种金属离子只能有限地重建脱辅基Cu,Zn-SOD的活性。

关键词(KeyWords): 重组蛹虫草超氧化物岐化酶;脱辅基蛋白;表达;纯化;活性重建

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 胡圣尧;聂志妍;王尊生;袁勤生;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2008.06.36.hushy.006

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