中国生物制品学杂志

2011, v.24(12) 1473-1476

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液质联用法分析重组抗肿瘤抗病毒蛋白的一级结构
Analysis of Primary Structure of Recombinant Antitumor-Antivirus Protein by Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

李萌;裴德宁;陶磊;李永红;王兰;高凯;饶春明;王军志;

摘要(Abstract):

目的通过液质联用法分析重组抗肿瘤抗病毒蛋白(乐复能)的一级结构。方法采用高效液相-电喷雾四级杆飞行时间质谱技术(High performance liquid chromatography-electrospray ionization-quadrupole-time of flight-mass spectrometry,HPLC-ESI-Q-TOF-MS)绘制乐复能经胰蛋白酶酶切后的液质肽图,并定位二硫键;采用电喷雾四级杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF-MS)测定乐复能的精确相对分子质量。结果乐复能液质肽图的22个理论酶切肽段中,有6个肽段(T2、T5、T12、T15、T19、T22)共7个氨基酸未被检测到,氨基酸覆盖率为96%;通过分析胰蛋白酶酶切液质肽图,发现1种二硫键连接方式:Cys1-Cys29、Cys99-Cys139;质谱测定相对分子质量为19 311.63,与理论相对分子质量(19 311.27)的相对误差为0.000 02%。结论建立了乐复能的液质肽图分析方法,为该类制品的质量控制及其参考品的研制提供了参考。

关键词(KeyWords): 液质联用;重组蛋白质类;氨基酸序列;二硫键定位;分子量

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技重大专项课题(2009ZX09307-001)资助

作者(Author): 李萌;裴德宁;陶磊;李永红;王兰;高凯;饶春明;王军志;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2011.12.98.lim.030

参考文献(References):

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