中国生物制品学杂志

2009, v.22(06) 602-604

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抗黄曲霉毒素B1重链IgG2b亚型单克隆抗体的制备及应用
Preparation and Application of Heavy Chain IgG2b Isotype McAb against Aflatoxin B1

裴世春;李玉花;张园园;才琳;

摘要(Abstract):

目的制备抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的重链IgG2b亚型单克隆抗体,并建立黄曲霉毒素B1的间接竞争ELISA检测方法。方法采用AFB1-BSA偶联物为免疫抗原,AFB1-STI偶联物为检测抗原,利用间接竞争ELISA筛选分泌抗AFB1单抗的细胞株,并对抗体进行鉴定。结果筛选到1株能分泌特异性抗AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其染色体数目为(90±10)条;所分泌的单抗亚类重链为IgG2b,轻链为λ;间接ELISA检测该株杂交瘤细胞分泌上清效价在1∶12800~1∶25600,纯化腹水效价为1∶105~1∶106。传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;建立的间接竞争ELISA检测方法的最低检出限为0.001ng/ml,校正曲线的线性范围为0.005~5ng/ml,IC50为0.01ng/ml;与AFB1的结构类似物AFM1和化学结构有差异的脱氧雪腐镰刀菌烯醇的交叉反应率分别为1.4%和<1%。结论所制备的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体具有高度特异性和稳定性,可应用于间接竞争ELISA检测方法。

关键词(KeyWords): 黄曲霉毒素B1;重链IgG2b亚型;单克隆抗体;酶联免疫试验

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30771799);; 黑龙江省教育厅项目(1151hz025);; 中国博士后科学基金资助项目(20070410882)

作者(Authors): 裴世春;李玉花;张园园;才琳;

DOI: 10.13200/j.cjb.2009.06.79.peishch.012

参考文献(References):

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