中国生物制品学杂志

2015, v.28(04) 390-397

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C、Y、W 135群脑膜炎球菌荚膜多糖化学结构核磁共振检测方法的建立
Development of nuclear magnetic resonance method for analysis of chemical structure of groups C, Y and W135 Neisseria meningococcal capsular polysaccharides

李阿妮;于旭博;罗树权;胡浩;孔素娟;袁菲;杨英英;刘方蕾;吴兵;陈作江;赵志强;谢贵林;

摘要(Abstract):

目的建立基于核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)技术检测C群脑膜炎球菌荚膜多糖(group C meningococcal capsular polysaccharide,GCMP)、Y群脑膜炎球菌荚膜多糖(GYMP)和W135群脑膜炎球菌荚膜多糖(GWMP)化学结构的方法。方法建立1H-NMR检测方法:使用布鲁克600 MHz超导傅里叶核磁共振谱仪,配置5 mm BBO正向宽带高分辨液体探头。脉冲程序为水峰压制(zgpr),温度为298 K(25℃)。具体参数设置如下:中心频率约为4.7 ppm;图谱宽度为7 211 Hz;采样时间为2.272 s;弛豫延迟时间为2 s;扫描次数为512次;信号经傅里叶转换后加入1.0 Hz的窗口函数,检测结果使用Topspin 3.0软件进行处理。验证该方法的专属性、重复性及中间精密性。结果 5批GCMP、GYMP和GWMP检测结果的CV值均小于0.35%;3个浓度GCMP、GYMP和GWMP在相同的操作条件下以及不同工作日间、不同实验员间的检测结果的CV值均小于0.35%。结论建立的1H-NMR检测方法简便、快速、准确,检测GCMP、GYMP和GWMP具有极高的专属性、重复性和中间精密性,适用于疫苗生产研究中GCMP、GYMP和GWMP样品的定性结构鉴定。

关键词(KeyWords): 脑膜炎球菌;荚膜多糖;核磁共振

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技重大专项重大新药创制专项(2013ZX09402-302-215);; 国家科技支撑计划项目(2008BAI66B01);; 甘肃省科技重大专项(0801NKDA003);; 甘肃省“十二五”陇药产业发展规划项目

作者(Author): 李阿妮;于旭博;罗树权;胡浩;孔素娟;袁菲;杨英英;刘方蕾;吴兵;陈作江;赵志强;谢贵林;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.000855

参考文献(References):

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