中国生物制品学杂志

2005, (01) 33-35

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人组织激肽释放酶成熟蛋白的纯化及活性分析
Preparation in Small Scale, Purification and Bioactivity Analysis of Mature Human Tissue Kallikrein

李体远,杜珙,朱莹,黄瑞芳,陈德珩

摘要(Abstract):

目的 制备纯化人组织激肽释放酶 ,并检测其生物活性 ,为中试放大及纯化工艺奠定基础。方法 使用麦芽糖 (MBP)融合分泌载体pMBP P ,构建并筛选出 1株工程菌株 ,在 6L培养基中经IPIG诱导表达人组织激肽释放酶融合蛋白。目的蛋白经亲和层析纯化及凝血酶切割后 ,采用电位滴度法测定其活力。结果 筛选出的工程菌株表达相对分子质量约 70 0 0 0的激肽释放酶融合蛋白 ,大小与预计大小相符。纯化后共获得 2 8mg蛋白 ,并具有水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力。结论 成功进行了人组织激肽释放酶融合成熟蛋白的小量制备 ,经纯化后的产物具有生物活性 ,为中试放大、纯化工艺研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 人组织激肽释放酶;大肠杆菌;制备;纯化;生物活性

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省十五攻关课题 (C1180 1)

作者(Author): 李体远,杜珙,朱莹,黄瑞芳,陈德珩

DOI: 10.13200/j.cjb.2005.01.37.lity.012

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