中国生物制品学杂志

2012, v.25(01) 104-107

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脑心肌炎病毒抗体双抗原夹心ELISA检测方法的建立及初步应用
Development and preliminary application of double antigen sandwich ELISA method for encephalomyocarditis virus

樊得英;冯若飞;李向茸;张海霞;凡静静;沈心亮;马忠仁;

摘要(Abstract):

目的建立脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)抗体双抗原夹心ELISA检测方法,用于EMCV血清学调查及临床检测。方法采用EMCV基因重组蛋白VP1、VP2和2C作为包被抗原,HRP标记EMCV作为酶标抗原,建立EMCV抗体双抗原夹心ELISA检测方法;用内部参考血清对建立的方法进行评价,并与间接ELISA法进行比较;采用所建立的方法对1 475份人血清和1 309份猪血清进行检测。结果建立的双抗原夹心ELISA法的最佳抗原包被浓度为7.5μg/ml,封闭液为10%马血清或2%鱼蛋白胨,酶标抗原稀释度为1∶400。该方法的批内和批间变异系数均小于10%;热稳定性较好;与间接ELISA法检测结果的符合率为93.5%。应用建立的方法检测人血清和猪血清中的EMCV抗体阳性率分别为16.8%和63.4%。结论已建立了EMCV抗体双抗原夹心ELISA检测方法,该方法可靠、稳定、特异、敏感、操作简便,为EMCV抗体的临床检测提供了有效的技术手段。

关键词(KeyWords): 脑心肌炎病毒;抗体;酶联免疫吸附测定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31160033);; 国家民委科研项目(10XB03);; 甘肃省教育厅科研项目(1018B-04)

作者(Author): 樊得英;冯若飞;李向茸;张海霞;凡静静;沈心亮;马忠仁;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2012.01.109.fandy.022

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