中国生物制品学杂志

2005, (01) 29-32

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利用DNA改组筛选高活性抗凝血酶Ⅲ
Screening of Antithrombin Ⅲ(AT-Ⅲ) with High Bioactivity by DNA Shuffling in P.pastoris

于群,宋丽雅,贺敏,卜凤荣,孙文种,窦桂芳,章金刚

摘要(Abstract):

目的 利用DNA改组技术大幅度提高抗凝血酶Ⅲ (AT -Ⅲ )的生物活性。方法 采用RQ1DNaseⅠ不完全酶解ST -Ⅲ基因 ,产生长度为 5 0~ 10 0bp的随机片段 ,用低熔点胶回收。无引物PCR从小片段组装成大片段 ,通过有引物PCR得到正确大小的片段。线性化的质粒通过电转转入毕赤酵母GS115细胞。结果 获得了 5株高活性的克隆。结论 探索了在毕赤酶母进行DNA改组和筛选的方法和路线 ,成功进行了AT Ⅲ的改组 ,并为其它分子的改组提供借鉴。

关键词(KeyWords): 抗凝血酶Ⅲ;DNA改组;巴斯德毕赤酵母

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 于群,宋丽雅,贺敏,卜凤荣,孙文种,窦桂芳,章金刚

DOI: 10.13200/j.cjb.2005.01.33.yuq.011

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