中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

疫苗研究

  • 国内外卡介菌亚株抗生素敏感特性分析

    付丽丽;王国治;寇丽杰;赵爱华;

    目的分析国内外不同卡介菌亚株的抗生素敏感特性。方法对国内外不同卡介菌亚株采用比例法进行一线抗结核药物[异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampicin,RFP)、链霉素(streptomycin,SM)及乙胺丁醇(ethambutol,EMB)]、二线抗结核药物[左旋氧氟沙星(levofloxacin,LFX)、丁胺卡那霉素(amikacin,AK)、卷曲霉素(capreomycin,CPM)、乙硫异烟胺(ethionamide,TH)及对氨基水杨酸(p-aminosalicylic acid,PAS)]敏感性分析,采用BACTEC MGIT960培养系统进行一线抗结核药物及吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)抗生素敏感性分析。结果经比例法分析,不同卡介菌亚株均对一线抗结核药物敏感,除对TH耐药外,对其他二线抗结核药物均敏感;经BACTEC MGIT960系统分析,不同卡介菌亚株对RFP、SM、EMB均敏感,对PZA均耐药;卡介菌亚株BCG Pasteur 1173及BCG Tokyo172对INH敏感,而BCG Danish 1331菌株及中国卡介菌菌种BCG D2 PB302、BCG NIFDC 945 SⅢ均对INH耐药。结论中国生产用卡介菌菌种BCG D2 PB302及BCG NIFDC 945 SⅢ在抗生素敏感性方面与BCG Danish1331菌株一致,与其他亚株有差异。

    2020年07期 v.33 729-731+737页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
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  • 新城疫病毒F蛋白与鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白的共表达、纯化及免疫原性

    李丽阳;刘欢欢;杜虹广;余丽芸;侯喜林;

    目的共表达新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)F蛋白与鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis virus,IBV)S1蛋白,纯化并分析其免疫原性。方法根据NCBI中NDV F及IBV S1片段基因序列,截取包含F及S1蛋白部分抗原表位基因片段,设计并合成引物,PCR扩增目的片段,依次连接至原核表达载体pET-32a(+)上,构建重组质粒pET-32a-F-S1,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达,并对IPTG浓度和诱导时间进行优化,SDS-PAGE分析目的蛋白可溶性;重组蛋白经Ni-NTA agarose层析纯化复性后,Western blot法检测其反应原性。将14日龄雏鸡随机分F-S1、NDV F、IBV S1及PBS组,肌内免疫3轮,间隔10 d,每轮连续免疫5 d,每日1次,100μg/只,首次免疫后每隔7 d采集血清,ELISA法检测雏鸡血清特异性IgG水平。结果经双酶切鉴定,重组质粒p ET-32a-F-S1构建正确。重组蛋白最适IPTG诱导浓度为0. 2 mmol/L,时间为3 h;其以包涵体形式存在,相对分子质量约为53 000;纯化的重组蛋白能与抗NDV及抗IBV阳性血清反应,浓度为1. 04 g/L。雏鸡免疫7~49 d,与PBS组比较,F-S1、NDV F及IBV S1组血清IgG水平均显著升高(P <0. 01)。结论成功制备了重组蛋白F-S1,该蛋白具有良好的反应原性,能诱导雏鸡机体产生体液免疫应答,为NDV F及IBV S1重组蛋白的后续应用奠定了基础。

    2020年07期 v.33 732-737页 [查看摘要][在线阅读][下载 788K]
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基础研究

  • 双启动子双报告基因真核表达质粒的构建及鉴定

    崔力沙;崔博沛;陈磊;吴星;梁争论;徐艳玲;李克雷;

    目的构建双启动子双报告基因真核表达质粒,并在293T细胞中表达,为筛选携带报告基因的肿瘤细胞系提供分子工具。方法以质粒pcDNA3. 1、pcDNA6-GFP、pSVA-Luc为模板,分别扩增CMV、GFP和Luc基因序列,通过In-fusion法将3个基因片段与经HindⅢ、XhoⅠ双酶切的pcDNA3. 1载体连接,构建双启动子双报告基因重组真核表达质粒pC-T2A-Luc-GFP,转染293T细胞,荧光显微镜直接观察GFP的表达,化学发光仪检测Luc的表达。提取293T细胞总RNA,RT-PCR法扩增p53基因,通过In-fusion法将p53基因连接于质粒pC-T2A-Luc-GFP上,构建质粒pC-p53-T2A-Luc-GFP,转染293T细胞,Western blot法检测p53的表达,化学发光仪检测Luc的表达。结果重组真核表达质粒pC-T2A-Luc-GFP经酶切及测序鉴定构建正确,GFP和Luc双报告基因均可在293T细胞中正确表达,且可用于后续的动物模型建立。pC-p53-T2A-Luc-GFP质粒中p53的插入降低了Luc的表达,但其表达仍为阳性,不影响Luc的正常检测。结论成功构建了双启动子双报告基因真核表达质粒pC-T2A-Luc-GFP,并可在293T细胞中表达,为建立携带报告基因的肿瘤细胞系及肿瘤模型奠定了分子基础。

    2020年07期 v.33 738-742+747页 [查看摘要][在线阅读][下载 604K]
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  • 人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活检测

    张曦;杨丽;李静芳;高艳章;石琼;潘玉卿;

    目的构建人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒,并进行自激活检测。方法根据GenBank中登录的GINS2基因编码区序列(NM_016095)设计引物,以pCDNA3. 1-GINS2质粒为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆至诱饵载体pGBKT7上,构建诱饵质粒pGBKT7-GINS2。将鉴定正确的诱饵质粒及对照质粒共同转化至酵母细胞AH109中培养,Western blot法检测诱饵蛋白GINS2的表达,随机挑取6个菌落,进行His3、Ade2及LacZ报告基因的自激活效应检测。结果经双酶切及测序鉴定证明诱饵质粒pGBKT7-GINS2构建正确。诱饵蛋白GINS2相对分子质量为21 000,可在AH109酵母细胞中稳定表达。诱饵质粒转化的酵母细胞在SD/-Trp/-Leu缺陷平板生长,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade缺陷平板上不生长,表明报告基因His、Ade2未被激活,报告基因LacZ检测结果与阴性对照相同,表明诱饵蛋白GINS2不存在自激活。结论成功构建了人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒,其表达蛋白对酵母AH109细胞无毒性,也无自激活现象,可用于后续蛋白筛选试验。

    2020年07期 v.33 743-747页 [查看摘要][在线阅读][下载 546K]
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  • 结核分枝杆菌潜伏期抗原Rv3044的原核表达及其免疫原性

    张京燕;郭旭霞;王晓春;

    目的表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M. tb)潜伏期特异抗原Rv3044,并检测其能否被结核(tuberculosis,TB)感染者外周血T细胞识别,及其在小鼠模型中的免疫原性。方法以分子克隆技术构建质粒pET28aRv3044,IPTG诱导表达、亲和层析纯化r Rv3044蛋白,Western blot法进行鉴定;全血IFNγ分析试验(whole blood IFNγanalysis test,WBIA)检测其是否被TB感染者识别;联合融合佐剂DMT免疫C57BL/6小鼠,检测特异性CD4+Th1型应答和体液免疫应答水平。结果构建的重组表达质粒p ET28a-Rv3044经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达及纯化的rRv3044蛋白相对分子质量均为38 600。r Rv3044刺激的TB感染者,尤其TB潜伏感染(latent TB infection,LTBI)者,外周血T细胞分泌的IFNγ水平均显著高于健康对照者(P <0. 05);BCG+rRv044/DMT组诱导小鼠产生显著高水平的IgG抗体及其亚类,趋向于Th1型免疫应答,同时诱导小鼠脾细胞分泌高水平的特异性IFNγ和TNF-α。结论 r Rv3044可被TB感染者T细胞识别,具有较强的免疫原性,为具有潜力的TB候选疫苗靶抗原,可用于TB感染尤其是潜伏感染的预防及诊断。

    2020年07期 v.33 748-753+761页 [查看摘要][在线阅读][下载 661K]
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  • STAT5基因沉默及过表达对人乳腺癌细胞株紫杉醇耐药性的影响及其机制

    汪洋;柳明杰;

    目的探讨信号转导与转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription 5,STAT5)基因沉默及过表达对人乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7紫杉醇化疗耐药性的影响及可能的分子机制。方法构建紫杉醇耐药株SKBR3/PR和MCF-7/PR,Western blot检测STAT5蛋白表达情况;用STAT5特异性shRNA转染SKBR3/PR和MCF-7/PR细胞,MTS法检测SKBR3/PR-shRNA和MCF-7/PR-shRNA细胞对紫杉醇的敏感性;通过STAT5过表达脂质体载体及shRNA转染SKBR3和MCF-7细胞,MTS法和流式细胞术检测紫杉醇化疗对SKBR3-STAT、SKBR3-STAT-shRNA、MCF-7-STAT和MCF-7-STAT-shRNA细胞生存率和凋亡率的影响,Western blot及qPCR法检测细胞周期调控蛋白cyclin B1、CDK2和c-myc蛋白表达及mRNA转录水平。结果 SKBR3/PR和MCF-7/PR细胞中STAT5的表达显著高于SKBR3和MCF7细胞(P <0. 01),而SKBR3/PR和MCF-7/PR细胞STAT5沉默后,紫杉醇化疗敏感性显著升高(P <0. 05)。SKBR3和MCF-7细胞过表达STAT5后,紫杉醇敏感性显著降低(P <0. 05),细胞凋亡率显著下降(P <0. 05),cyclin B1、CDK2和c-myc蛋白表达及mRNA转录水平均显著上调(P <0. 01),而STAT5沉默后,其紫杉醇敏感性显著提高(P <0. 05),细胞凋亡率显著升高(P <0. 05),cyclin B1、CDK2和c-myc蛋白表达及mRNA转录水平均显著降低(P <0. 01)。结论 STAT5基因调控细胞周期相关因子cyclin B1、CDK2和c-myc的表达,进而介导乳腺癌细胞紫杉醇耐药。

    2020年07期 v.33 754-761页 [查看摘要][在线阅读][下载 2045K]
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  • lncRNA ZFAS1在食管癌中的作用及其机制

    唐金明;王文祥;

    目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)ZFAS1(lncZFAS1)对食管癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并初步探讨其机制。方法采用qRT-PCR法检测食管癌组织及食管癌细胞中lncZFAS1的表达;shRNA干扰lncZFAS1表达后,采用CCK-8法、流式细胞术、划痕试验、Transwell试验检测其对细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响;建立小鼠移植瘤模型,检测敲低lncZFAS1对移植瘤生长的影响。结果 lncZFAS1在食管癌组织及食管癌细胞中的表达均明显高于癌旁组织及正常食管上皮细胞。敲低lncZFAS1可显著抑制食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力;可使食管癌细胞中miR-150-5P表达上调,HMGA2表达下调;可显著抑制裸鼠移植瘤的生长。结论 lncZFAS1可促进食管癌细胞的增殖及迁移,其机制可能与调控miR-150-5P/HMGA2分子轴相关。

    2020年07期 v.33 762-768页 [查看摘要][在线阅读][下载 1838K]
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  • 人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型重组慢病毒载体的构建及其在人雄激素抵抗型前列腺癌PC3细胞中的表达

    丁焕;孙颖;黎莉;

    目的构建人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)重组慢病毒表达载体,并检测其在人雄激素抵抗型前列腺癌细胞株PC3中的表达。方法以人工合成的人INPP4B基因为模板,PCR扩增目的基因片段,克隆入pGC-FU载体构建重组质粒pGC-FU-INPP4B,将其与辅助包装原件PHelper 1. 0和PHelper 2. 0载体经Lipofectamine TM 2000介导共转染293T细胞,包装获得携带人INPP4B基因的重组慢病毒LentiINPP4B,免疫荧光法测定病毒滴度。用Lenti-INPP4B感染PC3细胞(Lenti-INPP4B组),以慢病毒Lenti-GFP(携带GFP基因)感染的PC3细胞为阴性对照,RT-PCR及Western blot检测PC3细胞中INPP4B m RNA水平和蛋白的表达,CCK8法检测PC3细胞增殖;Western blot检测PC3细胞中p-AKT水平。结果经PCR及测序鉴定,重组质粒p GC-FU-INPP4B构建正确;Lenti-INPP4B病毒滴度达2×10-8 TU/mL。与阴性对照组比较,Lenti-INPP4B组PC3细胞中INPP4B m RNA水平显著提高(P <0. 05),细胞活力抑制显著(P <0. 05),细胞内p-AKT水平降低;INPP4B蛋白在Lenti-INPP4B组细胞中表达,在阴性对照组中未表达。结论成功构建了INPP4B慢病毒表达载体,其在PC3细胞中的表达能显著抑制细胞增殖,可能是通过下调p-AKT水平发挥作用。本文为靶向治疗雄激素抵抗型前列腺癌提供了新思路。

    2020年07期 v.33 769-773页 [查看摘要][在线阅读][下载 464K]
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  • 电针刺激对大鼠条件性位置回避行为反应的影响及其作用机制

    杜振莹;侯苗苗;关晓雅;赵欣;李建国;张宇;

    目的探讨电针(electroacupuncture,EA)刺激对大鼠条件性位置回避(conditioned place avoidance,CPA)行为反应的影响及其可能的作用机制。方法免疫荧光染色法检测正常大鼠前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)脑区组织中μ-阿片受体和NR1的共表达情况。于大鼠ACC脑区内分别预先微量注射μ-阿片受体拮抗剂CTOP及0. 9%氯化钠(NS)后,经左脚掌皮下注射完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)诱导产生慢性炎性疼痛,并与特定环境进行匹配,建立CPA模型,再进行环跳穴位电针(electroacupuncture,EA)刺激(即CTOP+CFA+EA组和NS+CFA+EA组),同时设假EA刺激组(EA不通电,即CTOP+CFA+shamEA组和NS+CFA+shamEA组)及对照组(ACC及脚掌均注射NS,EA不通电,即NS+NS+shamEA组),记录CPA试验的第1、3天各组大鼠在痛侧匹配室停留时间,计算回避分数。将各组大鼠放置50℃热板上,检测EA刺激对大鼠热痛行为反应的影响。Western blot法检测各组大鼠ACC脑区组织中μ-阿片受体及磷酸化NR1(p-NR1)的表达水平。结果μ-阿片受体与NR1在正常大鼠ACC脑区同一个神经元上共表达。NS+CFA+shamEA组大鼠第3天在痛侧停留时间比第1天显著缩短(P <0. 001),回避分数比NS+NS+shamEA组显著增大(P <0. 001);NS+CFA+EA组大鼠第3天在痛侧停留时间与第1天相比,差异无统计学意义(P> 0. 05),回避分数比NS+CFA+shamEA显著减小(P <0. 001)。EA刺激不影响大鼠的热痛行为反应。与NS+CFA+shamEA组比较,NS+CFA+EA组大鼠ACC脑区μ-阿片受体表达量明显增高(P <0. 001),p-NR1蛋白表达量明显降低(P <0. 001)。CTOP可明显逆转EA刺激对CFA诱导CPA反应及ACC脑区μ-阿片受体、p-NR1的表达水平的影响(P <0. 001)。结论大鼠CPA反应可能是由CFA诱导ACC脑区p-NR1水平增高导致的,而EA刺激可通过激活μ-阿片受体来减弱该反应。

    2020年07期 v.33 774-778+787页 [查看摘要][在线阅读][下载 720K]
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治疗制剂

  • 重组人睫状神经营养因子突变体及其长效分子对饮食诱导性肥胖伴胰岛素抵抗大鼠的治疗作用

    柳森;郑秀玉;李素贞;刘建伟;刘明杨;王健;

    目的探讨重组人睫状神经营养因子(recombinant human ciliaryneurotrophic factor,rhCNTF)突变体rhCNTF(R6315)及其长效分子P-rhCNTF(R6315)对饮食诱导性肥胖(diet induced obesity,DIO)伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)模型大鼠的治疗作用。方法利用基因工程重组表达技术制备rhCNTF突变体rhCNTF(R6315)及其长效分子P-rhCNTF(R6315)。通过饮食诱导建立肥胖伴胰岛素抵抗大鼠模型(DIO-IR),经背部皮下分别注射rhCNTF(R6315)0. 025、0. 05及0. 1 mg/kg(每天1次)及P-rhCNTF(R6315)0. 025、0. 05、0. 1、0. 2及0. 4 mg/kg(每7 d1次),共治疗28 d,评价rhCNTF(R6315)及P-rhCNTF(R6315)对DIO-IR大鼠的治疗作用。结果 DIO-IR大鼠治疗28 d后,rhCNTF(R6315)0. 1 mg/kg剂量组高血清胰岛素水平显著改善(P均<0. 01),0. 05、0. 1 mg/kg剂量组肝脂肪变性均显著改善(P均<0. 01);P-rhCNTF(R6315)0. 2、0. 4 mg/kg剂量组高血清胰岛素水平显著改善(P均<0. 01),并恢复至正常水平,口服糖耐量无明显变化(P> 0. 05),0. 1、0. 2、0. 4 mg/kg剂量组高血清瘦素水平显著改善(P均<0. 05),同时总胆固醇水平显著改善(P均<0. 05),所有治疗剂量组肝脂肪变性均显著改善(P均<0. 05)。结论 rhCNTF突变体rhCNTF(R6315)及其长效分子P-rhCNTF(R6315)对DIO-IR大鼠的胰岛素抵抗、高瘦素血症、高胆固醇血症及肝脂肪变性均有显著的治疗效果,其中P-rhCNTF(R6315)发挥了长效作用。

    2020年07期 v.33 779-787页 [查看摘要][在线阅读][下载 1352K]
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诊断制剂

  • 人类免疫缺陷病毒口腔黏膜渗出液质控样本的制备

    马仲慧;宫赛赛;裴丽健;赫晓霞;程焕义;蒋岩;肖瑶;潘品良;邢文革;

    目的探讨人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)口腔黏膜渗出液(oral mucosal transudate,OMT)质控样本的制备方法,以用于制备HIV OMT快速检测(rapid diagnostic test,RDT)试剂方法学评价的评价盘。方法用6家HIV OMT RDT试剂(编号A~F)样本稀释液(编号D1~D6)分别对1份抗-HIV阳性血浆样本进行倍比稀释(2~1~2~(20)),采用A试剂检测,测定相应的GOD(gold optical density)值,确定各稀释液的线性范围和最适稀释度;根据最适稀释度,用6种稀释液分别对抗-HIV阳性血浆样本进行稀释并分装,评价稀释液的均一性和稳定性,选出最适稀释液;用最适稀释液倍比稀释(2~1~2~(20))4个系列混合阳性血浆样本,分别用A~F试剂检测,确定最适稀释度;用最适稀释液分别稀释40份抗-HIV阳性和40份HIV阴性血浆样本至最适稀释度制备质控样本,A试剂检测。结果稀释液D1~D6的线性范围分别为9~14、8~13、8~15、8~13、7~14、7~12(P <0. 05),最适稀释度为2~(10)。均一性评价中,D4稀释后样本的CV <20%;稳定性评价中,37℃放置1~15 d,D1、D3稀释后样本的CV <20%,室温放置1~15 d,D1、D4、D5稀释后样本的CV <20%,2~8℃放置1~30 d,D1、D3、D4稀释后样本的CV <20%,-20℃放置1~30 d,D6稀释后样本的CV <20%;选择D1为最适稀释液。随着倍比稀释次数增加,A试剂、B、C、E、F的GOD值或显色强度先增加后降低,试剂D的GOD值逐渐降低。4种稀释系列满足A~F试剂线性范围的稀释度分别为2~9、2~(10);2~8、2~9、2~(10);2~(10);2~8、2~9、2~(10),从中选出2~(10)为最适稀释度。利用最适稀释液和稀释度制备的多份阳性质控样本的平均GOD值为5. 82,标准差为3. 10;阴性质控样本GOD值均为0。结论确定用于制备HIV OMT质控样本的最适稀释液为D1,最适稀释度为2~(10)。制备方法合适,可用于制备HIV OMT RDT评价盘。

    2020年07期 v.33 788-793页 [查看摘要][在线阅读][下载 580K]
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临床研究

  • 新生儿接种10μg重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)的免疫原性及安全性观察

    范仁锋;陈俊虎;郑景山;汤妍;苏家立;黄竹航;曾培宇;余业斌;廖玉宜;舒雅俊;郑慧贞;张吉凯;

    目的观察新生儿接种3剂10μg重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)(hepatitis B vaccine made by recombinant deoxyribonucleic acid techniques in Saccharomyces cerecisiae yeast,Hep B-SCY)后的免疫原性及安全性。方法选择在广东省高州市和阳春市住院分娩孕妇进行筛检,检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等血清学指标,待孕妇分娩后,选择无疫苗接种禁忌的健康新生儿且符合本项目入选条件的作为观察对象,按0、1、6月免疫程序接种3剂10μg Hep B-SCY。采用化学发光法进行乙肝表面抗体(抗-HBs)定量检测。结果共548名受试者纳入免疫原性分析。母亲HBsAg阳性和阴性的新生儿分别为271人和277人,抗-HBs阳性率分别为98. 89%和99. 64%,组间差异无统计学意义(P> 0. 05);抗-HBs几何平均浓度(geometric mean concentration,GMC)分别为636. 44和681. 66 mIU/m L,组间差异无统计学意义(P> 0. 05)。不良反应发生率为2. 71%(19/701),局部不良反应发生率和全身不良反应发生率均较低,主要以1级不良反应为主。未观察到与接种疫苗相关的严重不良反应。结论新生儿接种3剂10μg Hep B-SCY后具有良好的免疫原性及安全性。

    2020年07期 v.33 794-798+808页 [查看摘要][在线阅读][下载 235K]
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  • 2008~2018年中国肠道病毒的地域性及时间性分布特征

    徐超;方丽;李冉;郑生伟;

    目的通过系统综述和Meta分析的方法,阐明引起我国手足口病的肠道病毒血清型的地域性及时间性分布特征,为相关产品临床试验提供指导。方法以Meta分析的方法,纳入2008~2018年间有关肠道病毒的流行趋势、时间性及地域性相关文章,分析并总结其中规律。结果共纳入文献59篇,覆盖全国26个省、自治区、直辖市。我国不同类型肠道病毒血清型的病例数及流行趋势存在较大差异。肠道病毒在全国范围内流行的血清型主要为EV71和CA16,存在地域性差异;肠道病毒的流行呈明显的季节性特征,4~7月为病毒感染的高发期。我国不同地区对肠道病毒血清型分型的研究存在差异。结论通过探索临床进展和地域差异影响下的手足口病相关肠道病毒谱的特点及流行区段跨度,为相关肠道病毒核酸检测试剂产品的开发及临床试验提供了参考。

    2020年07期 v.33 799-808页 [查看摘要][在线阅读][下载 597K]
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  • 脊髓灰质炎减毒活疫苗和灭活疫苗序贯免疫程序的基础免疫效果

    肖绍坦;杨天;费怡;邓鹏飞;杨来宝;

    目的评价口服脊髓灰质炎(简称脊灰)减毒活疫苗(oral live attenuated poliomyelitis vaccine,OPV)和脊灰灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)不同序贯程序的基础免疫效果。方法选取上海市浦东新区居住的≥2月龄婴儿为研究对象,分别于2、3、4月龄进行序贯(I-I-O)组、OPV全程(O-O-O)组和IPV全程(I-I-I)组的基础免疫程序的接种,检测免疫前及完成基础免疫后,各组血清中脊灰病毒中和抗体,并计算保护率及几何平均滴度(GMT)。结果各组研究对象体重、性别构成比差异无统计学意义(P> 0. 05),年龄差异有统计学意义(P <0. 05);免疫前,O-O-O组Ⅰ、Ⅲ型脊灰抗体GMT分别为24. 14和4. 44,抗体保护率分别为30. 56%和13. 89%;I-I-O组Ⅰ、Ⅲ型抗体GMT分别为11. 86和5. 91,抗体保护率分别为30. 00%和15. 71%;I-I-I组Ⅰ、Ⅲ型抗体GMT分别为22. 72和16. 14,抗体保护率分别为43. 06%和31. 74%;各组间Ⅰ、Ⅲ型脊灰中和抗体GMT和Ⅰ型保护率差异均无统计学意义(P>0. 05),但Ⅲ型脊灰中和抗体保护率差异有统计学意义(P <0. 05)。基础免疫后,O-O-O组Ⅰ、Ⅲ型抗体GMT分别为1 325. 33和946. 69,抗体保护率为100%和98. 61%;I-I-O组Ⅰ、Ⅲ型抗体GMT分别为1 840. 91和1 858. 51,抗体保护率均为100%;I-I-I组Ⅰ、Ⅲ型抗体GMT分别为1 085. 56和644. 86,抗体保护率为100%和98. 61%;各组间Ⅰ、Ⅲ型脊灰中和抗体GMT差异均有统计学意义(P <0. 001),抗体保护率差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论各种免疫程序均能获得较高的抗体保护率,其中国产IPV与OPV进行序贯接种后,能产生较好的免疫效果,可为受种儿童建立更有效的免疫屏障。

    2020年07期 v.33 809-812页 [查看摘要][在线阅读][下载 162K]
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  • 上海市2015~2018年含脑膜炎球菌成分疫苗疑似预防接种异常反应监测分析

    吴琳琳;刘捷宸;邵慧勇;李智;杨建萍;孙晓冬;

    目的分析上海市2015~2018年含脑膜炎球菌成分疫苗(meningococcus-containing vaccine,MCV)疑似预防接种异常反应(adverse events following immunization,AEFI)发生特征和预防接种安全性。方法通过中国AEFI监测信息管理系统收集上海市2015~2017年报告的A群脑膜炎球菌多糖疫苗(group A meningocaccal polysa-ccharide vaccine,MPV-A)、A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗(groups A+C meningococcal polysaccharide vaccine,MPV-AC)、A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗(groups A+C meningococcal polysaccharide conjugate vaccine,MPCV-AC)、ACYW135群四价流脑多糖疫苗(groups A+C+Y+W135 meningococcal polysaccharide vaccine,MPV-ACYW135)和A群C群脑膜炎球菌(结合)b型流感嗜血杆菌(结合)联合疫苗(meningococcal groups A and C and Haemophilus influenzae b conjugate vaccine,MPV-AC/Hib)AEFI个案,采用描述流行病学方法进行分析。结果上海市2015~2018年共报告含流脑成分联合疫苗AEFI个案9 174例,年平均报告发生率为243. 60/10万剂。5种含流脑成分疫苗的AEFI报告发生率最高为363. 85/10万剂,最低为145. 13/10万剂,且5种疫苗的AEFI报告发生率差异有统计学意义(P <0. 001)。在报告病例中,男女性别比为1. 19∶1;0~1岁占69. 42%;接种疫苗后0~1 d发生5 518例(79. 48%);一般反应8 908例(236. 23/10万剂);异常反应251例(3. 40/10万剂),主要为过敏性皮疹(239例,6. 49/10万剂)。结论上海市2015~2018年5种含流脑成分疫苗接种安全性均良好,不良反应均以发热和局部反应为主。

    2020年07期 v.33 813-817页 [查看摘要][在线阅读][下载 182K]
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技术方法

  • 激光粒度仪在评价吸附无细胞百白破疫苗颗粒一致性及稳定性中的应用

    李喆;黄小艳;吴燕;宋晓红;龙珍;李月琪;黄涛宏;马霄;

    目的应用激光粒度仪评价吸附无细胞百白破疫苗(以下简称百白破疫苗)颗粒粒径及分布的一致性和稳定性。方法使用激光粒度仪SALD-7500nano,采用批式池和高浓度池系统测定百白破疫苗、抗原蛋白及铝佐剂颗粒粒径及分布;选取不同中值粒径(D50)聚苯乙烯微球验证仪器的准确性及重现性;采用该仪器分析铝佐剂(A及B厂家)对百白破抗原蛋白的吸附效果,评价百白破疫苗(A、B及C厂家)颗粒粒径一致性(批内及批间)及稳定性(长期、加速及机械刺激)。结果 D50分别为0. 05、1及25μm的聚苯乙烯微球有证标准物质重复测定6次D50的相对误差(relative error,RE)<0. 05%,RSD <5%,激光粒度仪的准确性及重现性良好。A及B厂家疫苗抗原蛋白颗粒粒径分布在30~300 nm范围,铝佐剂颗粒粒径分布在1~30μm之间,疫苗颗粒粒径在1~300μm范围,表明铝佐剂对抗原蛋白吸附效果良好。4批A厂家疫苗批间颗粒D50的CV为37%,A及B厂家疫苗批内颗粒D50的CV均<5%,表明疫苗颗粒批间有一定差别,批内一致性良好。A及B厂家疫苗4℃保存0、30及60 d颗粒D50的CV均小于2%,表明疫苗长期储存稳定性良好;37℃保存1 d疫苗颗粒粒径变化较小,-20℃明显增大;百白破疫苗经批式池于连续搅拌120 min后静置12 h,A及C厂家疫苗颗粒D50的CV分别为1. 2%和> 10%,表明搅拌过程对疫苗颗粒粒径与分布存在一定影响。结论激光粒度仪系统的准确性及重现性良好,适用于百白破疫苗颗粒的一致性和稳定性评价。

    2020年07期 v.33 818-823页 [查看摘要][在线阅读][下载 1037K]
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  • 测定13价肺炎球菌结合疫苗多糖含量的速率比浊法的建立及验证

    韩菲;郝倩;张亭;尹珊珊;刘建凯;

    目的建立速率比浊法测定13价肺炎球菌结合疫苗多糖含量,并进行验证。方法采用免疫化学分析系统(IMMAGE 800),用氢氧化钠解吸附处理样品,测定13价肺炎球菌结合疫苗多糖含量,并对建立的方法进行线性、精密性、准确性、专属性及溶液稳定性验证。结果该方法在本研究条件下,1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型肺炎球菌荚膜多糖浓度在0. 5~3. 0μg/mL范围内,线性良好,相关系数(r)均大于0. 985 0;各型多糖含量重复检测的相对标准差(RSD)均低于10%,中间精密性检测的RSD均低于15%;各型多糖含量检测的加标回收率在80%~120%之间;2、8、9N、10A、11A、12F、15B、17F、20、22F、33F型肺炎球菌精制多糖在曲线浓度范围内不影响13价肺炎球菌结合疫苗各型多糖含量的检测,且19A与19F之间、6A与6B之间不存在交叉反应;13价肺炎球菌结合疫苗稀释后4 h以内测定多糖含量结果稳定。结论速率比浊法测定13价肺炎球菌结合疫苗结果准确,精密性好,可作为该疫苗的质控方法。

    2020年07期 v.33 824-828页 [查看摘要][在线阅读][下载 175K]
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综述

  • 临床前研究中内皮集落形成细胞的治疗作用

    李洁;李海霞;阎春生;哈小琴;

    内皮集落形成细胞(endothelial colony forming cell,ECFC)具有克隆潜力,能够在体内外生成成熟的内皮细胞,促进血管形成,可作为损伤组织血运重建的手段,应用前景良好。且ECFC具有可从外周血中无创分离和扩增、细胞培养时基因组稳定及操作简易等优点。本文就ECFC在临床前研究中细胞治疗(血管形成机制、旁分泌机制、外泌体机制)和基因治疗(血友病A、血管性血友病、贫血、癌症)方面的作用作一综述。

    2020年07期 v.33 829-831+836页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K]
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  • miR-22与肿瘤

    蒋如如;赵川;哈小琴;

    越来越多的研究表明,作为miRNA其中一员的miR-22在肿瘤的发生及发展中发挥抑癌或促癌等多重作用,影响肿瘤上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)、增殖、迁移、侵袭、转移及凋亡等过程,在肿瘤早期诊断及指导预后方面具有重要的指导意义。本文就miR-22与肿瘤发生、发展、早期诊断及预后的关系作一综述。

    2020年07期 v.33 832-836页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K]
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专题报道

  • 新型冠状病毒预防性疫苗非临床研究中的常见问题

    王寅;尹华静;王庆利;吴爽;尹茂山;李峥;戴学栋;孙涛;胡晓敏;

    <正>新型冠状病毒疫情暴发后,国内外企业迅速启动疫苗研发,据世界卫生组织(WHO)统计,目前全球在研新型冠状病毒疫苗(简称新冠疫苗)超过120个,且类型多样。国内现有5条技术路线的新冠疫苗在同步快速推进,包括病毒灭活疫苗、核酸疫苗(DNA疫苗和m RNA疫苗)、重组蛋白疫苗、腺病毒载体疫苗和减毒流感病毒载体疫苗,已有重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)及4家灭活疫苗进入临床试验阶段。

    2020年07期 v.33 837-839页 [查看摘要][在线阅读][下载 74K]
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  • 关于预防性疫苗异常毒性检测的几点思考

    金苏;姚昕;郭舒杨;项金忠;李敏;

    <正>通常含预防性疫苗在内的所有人用生物制品在灌装后的终产品阶段均需通过一项毒性或安全性检测[1],即异常毒性检测。这项检测最早在20世纪初(1900s)开始发展作为确保血液制品生产安全性及一致性的手段,之后拓展为用于所有生物制品检测外源污染物的一般化安全性检测。异常毒性检测曾一度为世界卫生组织技术指南(WHO Recommendations and Guidelines)及各国国家药典(National Pharmacopoeias)所推行[2]。但近年来随着疫苗研发、生产及质控等水平提高和产业升级,人们对异常毒性检测的意义、要求、方式、操作等各方面提出了疑问。

    2020年07期 v.33 840-844页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K]
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  • 长春市实施疫苗接种告知制度前后口服轮状病毒活疫苗接种率及疫苗认知情况分析

    陶育晖;郑彤;陶育纯;

    <正>疫苗接种是防控传染性疾病、提高人群免疫水平的重要预防手段。随着社会的发展,居民生活水平的提升,公众对疫苗相关知识、疫苗的效果及不良反应更加关注。在免疫规划工作过程中,实施接种疫苗告知制度,一方面是尊重接种者的知情权,另一方面可通过疫苗接种告知和签署知情同意书在一定程度上让接种者了解疫苗的相关信息,同时也避免一些"疫苗接种不良反应"纠纷的发生。目前,长春市向公民提供的二类疫苗中,轮状病毒疫苗可有效预防由轮状病毒引起的小儿腹泻。2018年长春市开

    2020年07期 v.33 845-848页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K]
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