中国生物制品学杂志

CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS

专栏——党为人民谋幸福的100年

  • 新型冠状病毒灭活疫苗研发及应用

    邓涛;年悬悬;张家友;黄仕和;杨晓明;

    新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)是由重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染引起的呼吸道传染病。COVID-19在全球范围的大流行造成了严重的公共卫生危机,已成为导致死亡的主要原因之一。为减轻COVID-19对公共健康和社会经济的影响,全球疫苗研发机构均在积极开发疫苗,目前上市的COVID-19疫苗包括灭活疫苗、病毒载体疫苗、mRNA疫苗和重组蛋白疫苗等多种类型。传统经典的灭活疫苗由于其生产工艺成熟、安全性良好、免疫原性稳定、可及性强,受到众多疫苗企业的青睐。目前已有多款COVID-19灭活疫苗获得紧急使用或批准附条件上市。本文就COVID-19灭活疫苗研发的毒种与细胞基质选择、生产工艺、临床前研究、对突变株的保护作用作一综述,并着重探讨COVID-19灭活疫苗的临床研究进展及其面临的挑战。

    2021年07期 v.34 761-769页 [查看摘要][在线阅读][下载 772K]
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疫苗研究

  • 无血清悬浮MDCK细胞库的建立及检定

    邹钰莹;张健;姚为民;王笑天;张兰婷;姜皓淼;宋昊;赵大鹏;吴业红;

    目的建立无血清悬浮MDCK细胞的主代细胞库及工作代细胞库,并进行检定。方法将购自欧洲细胞株/微生物保藏中心(European Collection of Authenticated Cell Cultures,ECACC)的无血清悬浮MDCK细胞扩大培养并建立主代细胞库和工作代细胞库,按照《中国药典》三部(2015版)通则、生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中的规定,对建立的细胞库进行检定,并进行流感病毒敏感性检测。结果建立的无血清悬浮MDCK细胞的主代细胞库及工作代细胞库细胞形态与文献中记录的悬浮MDCK细胞形态一致,各项检定结果均符合《中国药典》三部(2015版)中的规定,且对流感病毒保持了高敏感性。结论成功建立了无血清悬浮MDCK细胞库,为细胞基质流感疫苗的研究奠定了基础。

    2021年07期 v.34 770-774页 [查看摘要][在线阅读][下载 960K]
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  • Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗与不同包材的相容性

    平玲;牛杰;张铭润;何陆涛;唐靖月;卢振攀;赵冠华;蔡玮;

    目的评价Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(sabin inactivated poliovirus vaccines,sIPV)与3种玻璃包材的相容性。方法将3批sIPV半成品分别分装至同批中性硼硅玻璃管制西林瓶(2 mL)、预灌封注射器及中性硼硅玻璃管制西林瓶(4 mL),将1批sIPV半成品分别分装至3批上述不同的包材中。分别于(37±2)℃保存14 d、(25±2)℃保存6个月、2~8℃保存36个月,对疫苗的外观、装量、pH、无菌试验、细菌内毒素、D抗原含量等指标进行检测。计算3种包材sIPV于不同温度下保存不同时间的D抗原回收率,并进行比较。结果 3种包材分装的sIPV于不同温度下保存不同时间的各项指标检测结果均合格,且Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原回收率差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论 sIPV与3种不同玻璃包材均具有良好的相容性。

    2021年07期 v.34 775-781页 [查看摘要][在线阅读][下载 1070K]
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基础研究

  • 柯萨奇病毒A2病毒样颗粒的制备、纯化及鉴定

    禹玉婷;胡岗;罗志宇;卢佳;王泽鋆;孟胜利;申硕;

    目的制备柯萨奇病毒A2(Coxsackievirus A2,CV-A2)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),并对其进行纯化及鉴定。方法将CV-A2 P1和3CD基因序列根据昆虫细胞偏好特性进行密码子优化并人工合成,分别克隆至供体质粒pFastBacDual的多角体蛋白启动子(pPh)和pP10启动子后,构建重组质粒pFastBacDualCV-A2 P1-3CD,转化至大肠埃希菌(E. coli)DH10 BacTM中,转座形成重组bacmid,再将重组bacmid转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒rBacCV-A2 P1-3CD,经蔗糖垫底离心和氯化铯密度梯度离心法纯化rCV-A2 VLPs,SDS-PAGE、Western blot法检测浓度及纯度,透射电镜法观察VLPs颗粒形态。结果质粒pFastBacDualCV-A2 P1-3CD经双酶切鉴定,重组Bacmid、rCV-A2VLPs经PCR鉴定,均在预期目标条带处可见清晰条带;rCV-A2 P1-3CD蛋白经IFA鉴定可见明显荧光;rCV-A2 VLPs经SDS-PAGE及Western blot分析,均可见清晰的VP0(相对分子质量约39 000)、VP1(相对分子质量约34 000)和VP3(相对分子质量约27 000)条带;透射电镜观察纯化r CV-A2 VLPs,可见直径23~33 nm的颗粒,形态和大小与CV-A2一致。结论成功构建了pFastBacDualCV-A2 P1-3CD重组Bacmid质粒,并成功表达了rCV-A2 VLPs,为今后rCV-A2 VLPs疫苗的研发奠定了基础。

    2021年07期 v.34 782-787页 [查看摘要][在线阅读][下载 980K]
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  • 海拔对2型糖尿病患者外周血单个核细胞迁移及黏附功能的影响

    哈小琴;高彩艳;李萍;陆润兰;李兵;宋月娟;邢媛;朱晓红;宋薇;买志福;

    目的比较不同海拔对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)迁移及黏附功能的影响。方法选取咸阳市某医院T2DM患者25人及同期健康体检者20人,作为低海拔组,兰州市某医院T2DM患者29人及同期健康体检者20人,作为高海拔组。采集各组人群静脉血,密度梯度离心法提取PBMCs。ELISA法检测血清中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-l)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度;实时荧光定量PCR法检测PBMCs中趋化因子受体2[chemokine(C-X-C motif)receptor 2,CXCR2]、趋化因子受体4(CXCR4)和白细胞功能相关抗原-1(leukoctes function associated antigent-1,LFA-1)基因相对表达量;Western blot法检测CXCR2和CXCR4蛋白表达水平。结果高海拔组T2DM患者较低海拔组SDF-1和HIF-1α表达升高,IL-8和VEGF表达降低(P均<0.05)。高海拔组T2DM患者较健康者各基因相对表达量均降低,其中CXCR2和CXCR4基因相对表达量差异有统计学意义(P <0.001);低海拔组T2DM患者较健康者各基因相对表达量降低,但CXCR2基因相对表达量差异有统计学意义(P <0.001)。高海拔组较低海拔组CXCR2和CXCR4蛋白表达水平均降低(P <0.05),两组T2DM患者CXCR2和CXCR4蛋白表达水平均低于健康者(P <0.05)。结论随着海拔升高,T2DM患者较健康者缺氧程度加重,PBMCs迁移增强,黏附性和成血管能力减弱。

    2021年07期 v.34 788-792+797页 [查看摘要][在线阅读][下载 1039K]
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  • A型肉毒梭菌培养基中植物水解蛋白替代胰酪蛋白胨的可行性分析

    王云天;陈苏玲;苗承辉;陆俭;李晨昊;何星;

    目的对A型肉毒梭菌培养基中植物水解蛋白(tryptone substitute,TS)替代胰酪蛋白胨的可行性进行分析。方法对培养基TS浓度进行筛选试验,选择最佳TS浓度进行放大培养,制备3批TSYG(植物水解蛋白-酵母浸出粉-葡萄糖)培养基,检测培养液产毒力;用3批TSYG培养基制备结晶毒素,检测结晶毒素收率;比较TSYG培养基与常规使用的TYG(胰酪蛋白胨-酵母浸出粉-葡萄糖)培养基的产毒力,并比较两者生产的收获物的关键质控参数结晶毒素收率和纯度。结果 3批TSYG培养基产毒力均≥1×105LD50/mL,符合A型肉毒梭菌产毒培养的要求;3批TSYG培养基生产的结晶毒素收率均在0.8~7.0 mg/L之间,符合注射用A型肉毒毒素的质控标准;3批TSYG培养基与TYG培养基的产毒力以及生产的收获物的结晶毒素收率和纯度相比差异均无统计学意义(P均> 0.05)。结论在A型肉毒梭菌培养过程中,用TS替代产毒培养基中的胰酪蛋白胨是可行的。

    2021年07期 v.34 793-797页 [查看摘要][在线阅读][下载 978K]
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  • 丙戊酸钠和锌离子对CHO工程细胞抗体产量的影响

    宋瑞卿;苏杭;张玲;张路明;马宁宁;

    目的考察流加补料培养工艺中丙戊酸钠、锌离子及其浓度对表达单克隆抗体的CHO工程细胞抗体产量的影响。方法通过单因素试验筛选丙戊酸钠提高抗体产量的最佳浓度,以及可促进细胞生长并提高抗体产量的流加物质(氨基酸类、维生素类、金属离子等)及其最佳浓度。利用Minitab 17软件考察丙戊酸钠和锌离子两因子的交互作用,得到其最优水平,并进行验证。结果细胞培养第8天单次添加终浓度为1.5 mmol/L的丙戊酸钠,可使抗体产量提高(81.5±9.7)%;锌离子可促进细胞生长并明显提高抗体产量,细胞培养第3天开始,每24 h添加终浓度为90μmol/L的锌离子,可使抗体产量提高(38.3±4.3)%。丙戊酸钠和锌离子组合使用可使抗体产量分别比其单独使用提高27.0%和63.8%。结论组合使用丙戊酸钠、锌离子对CHO工程细胞抗体产量提高的比例明显优于单独使用,可能是丙戊酸钠促进抗体表达的同时抑制细胞生长,限制其提高抗体产量的潜力,锌离子的加入可减弱丙戊酸钠对细胞生长的影响,组合使用可更高效地表达抗体。

    2021年07期 v.34 798-803页 [查看摘要][在线阅读][下载 1118K]
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  • 牛miR-504靶基因对奶牛乳房炎调控机制的预测分析

    潘翠丽;汪书哲;王兴平;罗仍卓么;魏大为;蔡小艳;马云;

    目的预测分析牛miR-504(bta-miR-504)靶基因对奶牛乳房炎的调控机制。方法应用miRBASE数据库检索并分析miR-504成熟序列在不同物种中的保守性,TargetScan及miRWalk软件预测bta-miR-504的靶基因,DAVID在线软件对靶基因进行GO分类统计注释分析和KEGG通路注释分析,STRING在线软件和Cytoscape软件进行蛋白相互作用分析,采用Cytohubba软件中的11种方法计算并分析候选靶基因中的核心基因。结果 miR-504成熟区序列在不同物种间呈高度保守。共筛选出477个bta-miR-504候选靶基因,其参与的主要生物过程包括细胞内信号转导、细胞内蛋白转运和负调控MAPK活性等,显著富集于癌症、内吞、Ras、雌激素和胰岛素信号通路。与候选靶基因编码蛋白存在较多互作关系的蛋白包括TOLLIP、RIK3R1、TRAF6、EGFR、FBXL20、FBXL18、FBXO41、FBXL12等,其编码基因参与癌症、催乳激素、雌性激素、胰岛素、NF-kappa B、AMPK、Ras、TNF及心肌细胞肾上腺激素等信号通路。btamiR-504候选靶基因调控网络中的核心基因为TRAF6和CFTR。结论 bta-miR-504核心候选靶基因TRAF6和CFTR可能通过AMPK、Ras、Hepatitis C和Measles信号通路参与奶牛乳房炎的调控作用。

    2021年07期 v.34 804-810页 [查看摘要][在线阅读][下载 1773K]
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  • 肿瘤免疫调控新靶点YTHDF1蛋白分子结构及生物学功能分析

    王晰;文朝朝;魏艳;王海龙;郭睿;赵虹;张栋;弓韬;于保锋;

    目的分析肿瘤免疫调控新靶点YTH N6-甲基腺苷(m6A)RNA结合蛋白1[YTH N6-methyladenosine(m6A)RNA binding protein 1,YTHDF1]的分子结构及生物学功能。方法应用NCBI、ExPASy、SignalP、PSORTⅡ、SOPMA、STRING、SWISS-MODEL等软件工具分析YTHDF1蛋白的理化性质及其生物学功能,并通过MEGA 7软件建立YTHDF1蛋白的系统进化树。结果 YTHDF1是一种不稳定的碱性亲水蛋白质,无信号肽,无跨膜区;YTHDF1在多种肿瘤中高表达,在胃肠道肿瘤中表达最高;YTHDF1可能部分或更多定位在细胞核中;YTHDF1的二级结构主要由无规则卷曲构成;与YTHDF1相互作用的蛋白质包括WTAP、METTL3、FTO、METTL14、ALKBH5,YTHDF1主要参与RNA的转录后修饰、mRNA剪切的调控及DNA损伤修复反应。YTHDF1蛋白在进化过程中高度保守。结论 YTHDF1可能在细胞质中通过识别m6A提高蛋白翻译来促进肿瘤发生,也可能在细胞核中通过其他机制促进肿瘤发生。

    2021年07期 v.34 811-815页 [查看摘要][在线阅读][下载 1338K]
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  • 培养条件对百日咳杆菌发酵中百日咳毒素及丝状血凝素表达的影响

    杨勇;吴永超;张飞伟;杨坤;闵宪捷;刘佐军;雍雪飞;刘少祥;潘海龙;

    目的探讨培养条件对百日咳杆菌发酵中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)表达的影响。方法采用300 L全自动发酵罐进行百日咳杆菌发酵培养,培养基为百日咳S-S培养基,搅拌通气培养,培养量200 L,温度35~37℃,培养时间40 h,接种比例1∶12~1∶15。试验分为高PT表达组(搅拌转速为160 r/min,搅拌叶片为直叶,有挡板,培养0~20及21~40 h的通气量分别为600和400 L/min)、高FHA表达组(搅拌转速为220 r/min,搅拌叶片为弯叶,无挡板,培养0~20及21~40 h的通气量分别为400和600 L/min)及对照组(搅拌转速为180 r/min,搅拌叶片为直叶,有挡板,通气量为500 L/min),每组平行培养3批培养物。于培养结束时采用ELISA法检测PT及FHA含量。结果高PT表达组PT含量平均值达3.16μg/mL,比对照组(平均值2.23μg/m L)提升了41.7%(P <0.05);高FHA表达组FHA含量平均值达21.37μg/mL,比对照组(平均值11.00μg/mL)提升了94.3%(P <0.05)。结论百日咳发酵工艺中,高搅拌剪切力和较低的溶氧水平有利于PT的表达,低剪切力和高溶氧水平有利于提高FHA的产量。

    2021年07期 v.34 816-818+823页 [查看摘要][在线阅读][下载 1182K]
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治疗制剂

  • 胰高血糖素样肽-1衍生物的聚乙二醇定点修饰及其产物性质分析

    秦荣浦;田石华;江筠;刘敏;何成;杨宇峰;楼觉人;

    目的用马来酰亚胺活化的相对分子质量40 000的聚乙二醇(MAL-PEG40K)定点修饰胰高血糖素样肽-1衍生物(glucagon like peptide-1analogue,GLP-1a),并分析修饰产物部分性质。方法采用MAL-PEG40K定点修饰GLP-1a,强阳离子交换层析分离纯化修饰混合物,SDS-PAGE及反相高压液相色谱法(RP-HPLC)检测修饰产物MAL-PEG40KGLP-1a纯度,报告基因法检测其体外活性,动物急性降血糖试验检测其体内生物学活性。结果 MAL-PEG40K-GLP-1a经SDS-PAGE及RP-HPLC分析,纯度分别为95%和98.1%,体外活性保留率为22.9%,体内具有显著降血糖作用且药效时间明显延长。结论制备的MAL-PEG40K-GLP-1a药学性质获得显著改善,有望开发为安全、长效的新型GLP-1受体激动剂。

    2021年07期 v.34 819-823页 [查看摘要][在线阅读][下载 1195K]
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  • 藁本内酯对脂多糖诱导的肺上皮细胞损伤的保护作用及其机制

    张小芳;唐凤鸣;

    目的探讨藁本内酯(ligustilide,LIG)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的肺上皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法将人肺上皮细胞BEAS-2B分为对照组、LPS组和LPS+LIG组,分别加入空白溶剂或对应药物培养,采用CCK-8法检测LIG对LPS诱导的BEAS-2B细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡;透射电镜观察细胞显微形态;转染GFP-LC3荧光质粒后,激光共聚焦显微镜观察免疫荧光;Western blot法检测细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达水平。在LPS和LIG作用的细胞中加入自噬抑制剂羟氯喹(hydroxychloroquine,HCQ)或3-甲基嘌呤(3-methylpurine,3-MA),CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况。结果 LPS呈剂量依赖性抑制BEAS-2B细胞增殖,细胞凋亡率显著上升,LIG可有效缓解LPS诱导的细胞凋亡。LPS处理的细胞在透射电镜下可观察到线粒体形态异常,LIG+LPS组细胞观察到自噬空泡数量增加和线粒体与自噬空泡融合的现象。GFP-LC3质粒转染BEAS-2B细胞后,荧光显微镜下可见LPS组GFP聚集荧光点较对照组明显减少,加入LIG后,GFP聚集荧光点显著增加。LPS处理后,细胞凋亡相关蛋白水平上升,自噬相关蛋白水平下降,而加入LIG后,可部分逆转上述结果。加入自噬抑制剂3-MA或HCQ后,部分缓解了LIG对LPS诱导的BEAS-2B细胞损伤的保护作用。结论 LIG可能通过促进BEAS-2B细胞的保护性自噬,减轻LPS诱导的肺上皮细胞损伤。

    2021年07期 v.34 824-830页 [查看摘要][在线阅读][下载 1627K]
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诊断制剂

  • 肠道病毒71型抗原检测板不同保存方法稳定性的比较

    杨婷;李娅娴;李亚东;严皎;王永蓉;赵勇;文瑜;杜宋婷;刘正玲;

    目的比较干燥保存及湿保存肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)抗原检测板的稳定性。方法用羊抗EV71多克隆抗体包被96孔酶标板,制备20块EV71抗原检测板,10块板置空气干燥后真空包装,-25℃保存;另外10块板用洗涤液浸泡,封口后置4℃保存。分别于保存0、20、40、60、90、120、180 d时,检测5份EV71样品。结果干燥保存EV71抗原检测板检测5份样品7个时间点的均值分别为315.0、299.4、7 795.3、827.6、261.4 U/mL,湿保存的EV71抗原检测板检测结果均值分别为354.3、347.1、6 766.6、749.7、277.3 U/mL,各时间点两种方法检测结果差异无统计学意义(P> 0.05)。两种方法保存180 d时,EV71抗原检测板均可保持较好的活性(P> 0.05)。结论两种方法保存EV71抗原检测板6个月内,均具有良好的稳定性。

    2021年07期 v.34 831-834+842页 [查看摘要][在线阅读][下载 1254K]
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临床研究

  • 四价流感病毒裂解疫苗在成人及3岁以上儿童中的免疫原性和安全性评价

    李晓波;郭占龙;徐晓腾;徐文;李爽;李利;郭雪;吴业红;张雪梅;刘晓强;

    目的评价四价流感病毒裂解疫苗在成人及3岁以上儿童中的免疫原性及安全性。方法采用单中心、随机、双盲、阳性疫苗对照的非劣效试验,在云南省西双版纳傣族自治州勐海县和普洱市澜沧县选择成人及3岁以上儿童共2 400名,按照1︰1︰1接种1剂试验疫苗(四价流感病毒裂解疫苗)或2种对照疫苗(上市的三价流感疫苗和含另一谱系B型的三价流感疫苗)。所有受试者于免疫前、免疫后28 d采集静脉血,分离血清,检测H1N1、H3N2和B型(B/Victoria和B/Yamagata)流感病毒血凝抑制抗体,并计算抗体阳转率、抗体保护率、抗体GMT增长倍数。观察并记录所有受试者于每次接种后30 min内、0~7 d、0~28 d的不良事件(adverse event,AE)。随访接种疫苗后6个月内的严重不良事件(serious adverse event,SAE)。结果接种1剂试验疫苗或对照疫苗后,试验组各型抗体阳转率均非劣效于对照组的相同型别,试验组BY和BV型抗体阳转率优于不含BY/BV型的对照组。试验组与对照组H1N1、H3N2、BY、BV型抗体GMT比值的95%CI下限均> 0.67,试验组各型抗体GMT均非劣效于对照组的相同型别,试验组BY和BV型抗体GMT优于不含BY/BV型的对照组。所有人群H1N1、H3N2、BY、BV型试验组和对照组各型抗体阳转率95%CI下限均> 40%。H1N1、H3N2、BY、BV型血清抗体保护率的95%CI下限均> 70%。试验组和对照组各型抗体GMT均较免疫前增长2.5倍以上。试验组、对照组A、对照组B总AE发生率分别为26.00%、25.00%和27.25%;征集性AE发生率为21.50%、21.63%和21.75%;全身反应发生率为19.63%、20.13%和19.25%;局部反应发生率为2.88%、3.00%和2.88%。试验组和对照组AE发生率差异无统计学意义(P> 0.05)。结论长春生物制品研究所有限责任公司生产的四价流感病毒裂解疫苗在成人及3岁以上儿童中使用安全性良好,免疫效果显著。

    2021年07期 v.34 835-842页 [查看摘要][在线阅读][下载 1327K]
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  • 2019年EV-A71疫苗接种地区手足口病肠道病毒分子流行病学分析

    杨祥;徐长征;陈金华;孟胜利;王泽鋆;申硕;陈晓琦;

    目的分析2019年EV-A71疫苗在湖北省潜江市和谷城县两地区接种后,手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)相关肠道病毒病原谱结构及分子流行病学特征。方法采集谷城县2019年6—12月和潜江市2019年5—12月HFMD患儿肛拭子标本,通过多通道real-time RT-PCR技术对肠道病毒阳性样本进行初步分型筛选后,采用常规RT-PCR方法对肠道病毒VP1区部分基因扩增测序,通过DNAStar 7.0、MEGA 6.0等软件进行分子进化特征分析。结果共收集谷城县2019年6—12月和潜江市2019年5—12月HFMD样本520份,检出肠道病毒阳性样本490份,阳性率94.23%。其中谷城县检出肠道病毒阳性样本242份,共检出6种肠道病毒,各病原及构成比分别为CV-A6 84.30%、CV-A16 2.48%、CV-A10 7.44%、CV-A5 3.31%、CV-A4 0.83%、CV-A8 0.41%、其他未定型的肠道病毒(other enterovirus,other EV)1.24%;潜江市检出肠道病毒阳性样本248份,共检出4种肠道病毒,各病原及构成比分别为CV-A6 54.80%、CV-A16 40.4%、CV-A5 4.40%、CV-A8 0.40%。对几种主要流行的病原基于VP1分子进化树分析结果表明,谷城县和潜江市两地区的CV-A6均属于D3亚型,谷城县CV-A10属于C亚型,潜江市CV-A16属于B1b亚型,谷城县CV-A16属于B1a亚型。结论 2019年下半年,谷城县和潜江市两地区在EV-A71疫苗的干预下,HFMD病原谱为多种基因型的肠道病毒共同流行,其中CV-A6为优势病原体,未发现由EV-A71病原引起的HFMD,表明EV-A71疫苗的接种在接种地区形成了良好的保护效果。

    2021年07期 v.34 843-848+852页 [查看摘要][在线阅读][下载 1718K]
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  • 2019年长春市乙型肝炎及其相关疾病的疾病负担分析

    曹凤瑞;付思美;田鑫;程涛;康国俊;

    目的了解2019年长春市乙型肝炎及其相关疾病(肝硬化和肝癌)的疾病负担情况。方法通过《中国疾病预防控制信息系统》、《人口死亡信息登记系统》等相关数据,运用早逝所致的寿命损失年(years of life lost,YLLs)和失能引起的寿命损失年(years of lived with disability,YLDs)评价乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者的疾病负担情况。结果2019年长春市因乙型肝炎、肝硬化和肝癌损失的健康生命年分别为7 697.50、2 319.90和12 723.7 DALYs(disability adjusted life years,伤残调整寿命年);YLLs由高到低依次为肝癌、肝硬化和乙型肝炎,分别为12 621.40、2 210.60和766.40,而YLDs则相反,由高到低依次为乙型肝炎、肝硬化和肝癌,分别为6 921.10、109.2和102.4。除乙型肝炎外,肝硬化和肝癌的DALYs主要由YLLs构成,男性略低于女性。30~<50人群乙肝和50岁以上人群肝癌患者的疾病负担一直处于较高状态,DALYs均维持在3 000以上。结论 2019年长春市乙肝肝癌的疾病负担最重,乙型肝炎次之,乙肝肝硬化较轻,与国内其他地区持平,高于全球平均水平。

    2021年07期 v.34 849-852页 [查看摘要][在线阅读][下载 1218K]
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  • 冻干甲型肝炎减毒活疫苗上市后的安全性评价

    杨玫;夏娇慧;马千里;王辰皓;刘丽珺;姜崴;胡敏;郭雪;

    目的评价冻干甲型肝炎减毒活疫苗[hepatitis A(live)vaccine,freeze-dried,HepA-L]上市后的安全性。方法选择四川省2020年1月1日—12月31日接种HepA-L疫苗的人群为研究对象,通过全民健康保障信息化工程中国疾病预防控制信息系统免疫规划信息系统收集接种后的不良反应发生情况,回顾性分析该疫苗的疑似预防接种异常反应(adverse event following immunization,AEFI)的分类构成及报告发生率等指标。结果共接种HepA-L疫苗1 008 154剂次,报告AEFI 268例(报告发生率26.58/10万剂),其中一般反应223例(报告发生率22.12/10万剂),异常反应30例(报告发生率2.98/10万剂),心因性反应2例(报告发生率0.20/10万剂),偶合症13例(报告发生率1.29/10万剂)。一般反应主要为发热、红肿、硬结,异常反应主要为荨麻疹及过敏性皮疹,不良反应主要集中发生在接种当天及接种后1 d。268例AEFI均已治愈或好转。结论 HepA-L疫苗具有良好的安全性,可用于适龄人群甲型肝炎的预防。

    2021年07期 v.34 853-856+861页 [查看摘要][在线阅读][下载 1288K]
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技术方法

  • 新型冠状病毒S蛋白抗体的制备及初步应用

    徐康维;何蕊;权娅茹;苏喆;王剑锋;赵慧;李长贵;

    目的制备新型冠状病毒S蛋白抗体,初步建立检测新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量的方法。方法使用新型冠状病毒重组S蛋白分别免疫羊和兔,获得抗血清。采用间接ELISA法和微量中和试验检测抗血清效价,免疫印迹试验检测抗体特异性。采用蛋白G纯化树脂分别对羊和兔抗血清进行亲和层析纯化,获得抗体。以纯化后的羊抗体作为包被抗体,兔抗体作为显示抗体,建立新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量检测方法。结果对羊进行4次免疫后,抗血清ELISA效价达220 000,中和抗体效价达1 536。对兔进行3次免疫后,抗血清ELISA效价达220 000,中和抗体效价达4 096。羊和兔抗体均可与新型冠状病毒S蛋白特异性结合。应用纯化后的抗体,成功建立了检测抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法线性良好,R2> 0.99,可用于新型冠状病毒灭活疫苗原液抗原含量的检测。结论成功制备了羊和兔抗新型冠状病毒S蛋白高效价抗体,并初步建立了新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法。

    2021年07期 v.34 857-861页 [查看摘要][在线阅读][下载 1353K]
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  • 包涵体重组蛋白不同纯化方法的比较

    常恒祯;常江;战俊澎;杨馨;郭珣;刘益辛;邹德颖;任洪林;

    目的比较切胶、包涵体复性及Ni-NTA亲和层析3种方法纯化包涵体重组蛋白的效果。方法筛选全长IL-1β与全长IL-1Ra重组质粒(简称IL-1β-1Ra-2重组质粒)及全长IL-1Ra重组质粒的转化感受态菌株[感受态E. coli BL21(DE3)、E. coli BL21(DE3)PLysS及E. coli BL21-Codon Plus(DE3)-RIPL]、IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mmol/L)、诱导温度(16和37℃)。最佳表达条件诱导的IL-1β-1Ra-2重组质粒,分别用切胶、包涵体复性及Ni-NTA亲和层析法进行纯化,确定最佳纯化方法。采用最佳表达条件分别诱导表达IL-1β-1Ra-2重组质粒及全长IL-1Ra重组质粒后,通过最佳纯化方法进行纯化,纯化产物进行SDS-PAGE及Western blot分析。结果 IL-1β-1Ra-2重组质粒及全长IL-1Ra重组质粒最佳转化感受态菌株为E. coli BL21-Codon Plus(DE3)-RIPL,最佳IPTG浓度分别为1和0.4 mmol/L,诱导温度为37℃;最佳纯化方法为包涵体复性纯化法。IL-1β-1Ra-2及全长IL-1Ra重组蛋白包涵体复性纯化产物相对分子质量分别约为10 560和19 770,纯度可达90%以上,可溶性蛋白回收量分别约为46及63 mg,且均可与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合。结论相同条件下,包涵体复性纯化法获得的可溶性蛋白回收量最大,适用于相对分子质量约10 000的非高表达包涵体蛋白的纯化。

    2021年07期 v.34 862-867页 [查看摘要][在线阅读][下载 1381K]
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  • 一种基于等P/V策略的生物反应器缩小模型的建立

    赵丽丽;朱玉强;马动;张贵民;刘忠;

    目的应用3 L生物反应器,基于等P/V策略建立生产规模450 L生物反应器的缩小模型。方法应用3 L生物反应器,按照生产工艺培养稳定表达抗CD20人鼠嵌合单克隆抗体的CHO细胞,培养16 d应用亲和层析纯化抗CD20单克隆抗体,分子排阻法分析抗体聚体,弱阳离子高效液相色谱法分析抗体的酸性峰和碱性峰含量,2-AB标记法检测抗体糖型含量,mini-tab软件对结果进行双单侧检验(Two One-Sided Test,TOST)分析。结果与生产规模相比,缩小规模细胞生长、二氧化碳分压(pCO_2)水平及主要代谢产物乳酸和铵离子水平基本一致,抗体表达量、聚体含量、糖型结果及酸性峰和碱性峰含量经分析,均具有等价性。结论基于等P/V缩小原则成功建立了生产规模生物反应器的缩小模型。

    2021年07期 v.34 868-872页 [查看摘要][在线阅读][下载 1386K]
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综述

  • 3D生物打印中细胞活力的研究进展

    宋春艳;马思佳;钱明;

    3D生物打印是将细胞、生长因子和生物材料结合在一起,制造出模仿自然组织特征的生物医学部件,近年,该技术已广泛应用于组织工程相关研究中。生物墨水是3D生物打印的基础,细胞是生物墨水的重要组成部分,也是构建组织器官的关键之一,细胞活力是影响3D生物打印成功的决定因素,但3D生物打印过程较复杂,多种因素可影响细胞活力及其生物学行为。鉴于此,本文就3D生物打印中细胞活力的影响因素及改善细胞活力方法的研究进展作一综述,以期为3D生物打印的临床应用和实践提供理论依据。

    2021年07期 v.34 873-877页 [查看摘要][在线阅读][下载 1395K]
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  • 胰高血糖素样肽-1受体激动剂用于非酒精性脂肪肝病治疗的研究进展

    赛文博;吴舟一;

    近年来,我国非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者人数迅速上升,且发病年龄呈低龄化趋势,已逐步成为重要的公共健康问题。但截至2020年底,全球尚无获批用于NAFLD治疗的药物。与此同时,大量研究证明,胰高血糖素样肽-1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)类药物在调节人体糖脂代谢、改善胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)、缓解炎症和氧化应激反应等方面具有良好的疗效,提示其可能成为治疗NAFLD相关疾病的新选择。本文对NAFLD的发病机制、GLP-1RA药物治疗NAFLD的动物和人体试验结果,以及药物可能的作用途径作一综述。

    2021年07期 v.34 878-882页 [查看摘要][在线阅读][下载 1415K]
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专题报道

  • 重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)Ⅰ期临床试验各环节风险管理与质量控制

    钱小爱;贾斯月;李琼;邓鹏;王兆;杨北方;王雷;王文娟;江湖大川;官旭华;朱凤才;

    <正>新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease-19,COVID-19)疫情目前仍在全世界蔓延,我国自2019年12月在武汉发现以来迅速流行,严重危害到人类生命安全和社会经济发展[1]。我国政府采取围堵策略基本控制了COVID-1疫情[2],但绝大多数人对2019新型冠状病毒仍易感,我国或面临COVID-1疫情再次流行的风险。

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  • 《中国生物制品学杂志》稿约

    <正>《中国生物制品学杂志》于1988年创刊,主要报道我国生物制品科技成果及相关行业国内外研究现状和发展动态。本刊为月刊,由国家卫生健康委员会主管,中华预防医学会和长春生物制品研究所主办。1刊载内容和设置栏目主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等方面的研究、生产、使用及质控类学术文章,并兼顾重大学术交流活动的报道。在选择来稿时注重学术性、前沿性和实用性。

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